O que é coloração diferencial?

Embora micróbios ou células animais possam ser visíveis ao microscópio, as partes individuais da minúscula célula podem ser difíceis de diferenciar, pois as cores sob o microscópio podem parecer iguais ou a célula parecer transparente. Os analistas de laboratório especializados em análise microscópica de células usam métodos de coloração para transmitir cores à célula, para que possam ver claramente as partes. Coloração diferencial refere-se ao tipo de coloração que permite ao analista distinguir diferentes tipos de células; é um termo geral que engloba uma variedade de procedimentos de coloração.

Quando um animal é dividido em suas células, as células podem variar em aparência e função. Espécies comumente diferentes têm conjuntos de células que parecem individuais ao microscópio. Um exemplo comum da diferença entre espécies e grupos é o modo como a maioria das bactérias pode ser dividida em dois grupos com base em sua reação a um tipo específico de mancha chamado de Gram. Hans Christian Gram foi um microbiologista dinamarquês que inventou a mancha pela primeira vez em 1844, que ainda é de uso comum como um primeiro passo útil na identificação de bactérias em laboratório.

Na coloração diferencial, uma amostra de uma população bacteriana é tratada com conjuntos de corantes em um processo que envolve etapas como aquecimento e lavagem das amostras, para que o corante penetre todas as células. As várias etapas usam corantes como violeta de cristal e fucsina, junto com outras substâncias como álcool e iodo para ajudar a fixar a cor. As células que aparecem em rosa são identificadas como Gram-negativas, enquanto as células de cor azul no final do processo são Gram-positivas. Essa diferença de cor ajuda o microbiologista a identificar qual tipo de parede celular a espécie possui, o que ajuda a diminuir a lista possível de espécies às quais uma amostra desconhecida pertence. Além de indicar o tipo de Gram, o processo de coloração diferencial torna as formas e os arranjos das células mais óbvios, o que também ajuda na identificação.

As células animais também podem ser classificadas ao microscópio com coloração diferencial. Por exemplo, as células que circulam no sangue reagem de maneira diferente a certas manchas. Um exemplo é a mancha de Wright, que incorpora corantes como eosina e azul de metileno, e que pode informar a um analista de laboratório quais tipos de células sanguíneas estão presentes em uma amostra e em que concentração. Por exemplo, uma célula de eosinófilos tende a absorver muita coloração de eosina em comparação com outras células do sangue. Os analistas geralmente usam a coloração da mancha identificada através da coloração diferencial, juntamente com outras características das células, como tamanho, forma e estruturas internas, para descobrir quais células estão em uma amostra.