O que é eletroforese em gel de DNA?
A eletroforese em gel de DNA é um processo usado para separar proteínas e ácidos nucleicos na biologia molecular. O gel é geralmente composto de um polímero reticulado e acrilamida que ajuda na separação e análise de diferentes partes de uma molécula de DNA. A eletroforese em gel de DNA é comumente usada em análises forenses para determinar a sequência específica de DNA e ajudar a encontrar o principal suspeito. Também é comumente usado na genética e nos campos da biologia molecular e bioquímica.
Os ácidos nucléicos e proteínas carregam uma carga positiva ou negativa. Quando colocadas em uma câmara elétrica na eletroforese em gel de DNA, cada carga elétrica se move em direção a cada extremidade da câmara. As moléculas carregadas elétricas negativas se moverão para a extremidade positiva da câmara, enquanto as moléculas carregadas elétricas positivas se moverão para a extremidade negativa. O gel separa cada uma dessas moléculas para que elas se espalhem uniformemente por toda a leitura. O gel é composto de fibras longas que impedem que as moléculas se movam para ajudar na análise das moléculas individuais.
Southern blotting é uma técnica usada na eletroforese em gel de DNA para determinar a presença ou ausência de uma sequência nucleotídica específica em uma molécula de DNA. Northern blotting é uma técnica diferente usada para identificar a expressão gênica na presença de RNA ou ácido ribonucleico. O Western blotting é usado para determinar a presença de lipídios, proteínas e carboidratos em uma sequência de DNA. Para simplesmente detectar proteínas em uma sequência de DNA, a técnica de western blotting é usada na câmara de eletroforese através do isolamento de gel.
A zimografia também é uma abordagem para detectar certas funções biológicas através da eletroforese em gel de DNA. É usado principalmente para estudar enzimas extracelulares de degradação da matriz, que catalisam a destruição da matriz fora da célula, bem como a membrana basal de uma célula. O uso do gel de poliacrilamida ajuda a separar as enzimas, que são proteínas, usando um substrato de proteína como gelatina ou caseína. Essa técnica é usada para medir a quantidade de atividade de degradação que ocorre fora da célula.
A eletroforese em gel de DNA é usada com frequência em análises forenses. É usado para separar proteínas do sangue e DNA encontrados na cena do crime para determinar correlações com os suspeitos disponíveis. A eletroforese em gel também é usada para determinar uma herança específica na genética, pois certos DNA e proteínas estão associados a diferentes raças. Também é usado para resolver casos de paternidade para determinar o relacionamento relativo entre indivíduos.