Что такое обнаружение антител?

Обнаружение антител важно в медицине для выявления заболеваний, поскольку антитела представляют собой большие белки, которые могут обнаруживать вирусы и бактерии. Обнаружение антител проводится в лабораториях и на местах, чтобы исследовать связи антител и антигенов и идентифицировать антитело по его конкретному изменению цвета, когда молекула субстрата, реагирующего с ферментом, связана с ним, но все еще связана с антигеном. Тест на выявление известен как иммуноферментный анализ (ИФА). До разработки ELISA единственными тестами были радиоиммуноанализы, которые идентифицировали антитела по их специфической радиоактивности в 1960-х годах. В начале 1970-х годов были разработаны несколько методов ИФА для идентификации специфических антител.

Методика выявления антител методом непрямой сэндвич-ELISA готовит буферный раствор, содержащий антиген болезни, и связывает его с пластиковой пластиной. Затем вводится первичное антитело пациента для связывания с антигеном. Затем вводят вторичное антитело с прикрепленным ферментом и добавляют субстрат для фермента. Это вызывает реакцию, которая меняет цвет фермента, сигнализируя о связывании двух антител, если антитело от пациента является положительным для этого антигена заболевания. Сила изменения цвета обозначает количество заболеваний, обнаруженных антителом; эта сила цвета затем количественно измеряется спектрометром.

Другим методом ИФА, пригодным, когда образцы от пациентов являются грубыми или нечистыми, является конкурентный ИФА, когда немеченое антитело инкубируют с образцом антигена пациента. Связанный комплекс антитело / антиген промывают так, что несвязанное антитело удаляют, и вводят вторичное антитело, связанное с ферментом, специфичным для первичного антитела, для связывания с антигеном. При добавлении субстрата к ферменту, если антитело выявляет заболевание, фермент будет проявлять хромогенные или флуоресцентные свойства в качестве сигнала. Полевой тест, используемый израильскими врачами, использует пробирку, полную фрагментов белка и антител, и введение синей жидкости. Если синяя жидкость становится красной в течение десяти минут, определенный антиген в пробирке распознается антителом для этого конкретного заболевания.

В труднодоступных районах развивающихся стран лаборатории недоступны. Многие коммерческие наборы для определения антител были проданы медицинским работникам для тестирования на туберкулез, в частности туберкулез, связанный с вирусом иммунодефицита у детей и синдромом аутоиммунного дефицита (ВИЧ / СПИД). Одно исследование, включающее 68 конкретных исследований, показало, что эти наборы не были такими надежными, как микроскопия мазка мокроты

Малярия - это еще одно заболевание, для выявления антител в котором используется метод исследования флуоресцентных антител. Эта процедура хороша для скрининга доноров крови, поскольку малярия, вызванная переливанием крови, может не отображаться при простом исследовании пленки крови. Если пациент демонстрирует повторные образцы крови с отрицательным результатом, но имеет сильную симптоматику заболевания, тест на флуоресцентный маркер может выявить это. При исследовании под микроскопом антитела к малярии часто имеют яблочно-зеленый цвет, который является положительным для малярийного паразита.