Vad är ett rekombinant protein?
Ett rekombinant protein är vilket protein som helst som är framställt av rekombinant deoxiribonukleinsyra (DNA). DNA innehåller all organisms genetiska information och vidarebefordrar denna information genom proteinuttryck. Rekombinant DNA är en typ av DNA som har manipulerats för att inkludera DNA från en annan organisme. När det nya DNA transkriberas och översätts för att göra ett protein är ett rekombinant protein resultatet.
Proteiner är byggstenar i livet. Alla egenskaper som man ser på en människa - som hårfärg, ögonfärg och jämn höjd - bestäms av proteinproduktion. Många kroppsfunktioner är också resultatet av proteinproduktion. Detta inkluderar insulinproduktion och immunsystemets funktion. Genetiska defekter hos människor kan ibland behandlas genom att skapa rekombinanta proteiner i ett laboratorium som kan behandla dessa tillstånd.
När värden av det rekombinanta DNA är en organism som reproducerar sig snabbt, såsom bakterier, kan massmängder av det rekombinanta proteinet produceras. Denna teknik, kallad amplifiering, används i stor utsträckning i klonings- och genterapiprocesser. Andra värdar inkluderar jäst, svampar och till och med däggdjursceller. Vilken typ av värd som krävs beror på den avsedda användningen och mängden rekombinant protein som behövs.
När värden har valts kan en vektor bestämmas. En vektor är ett fordon som används för att införa det riktade DNA: t i värd-DNA: t. Vektorer är i allmänhet en modifierad version av ett virus eller en bakterie.
Vissa vektorer är speciellt utformade DNA-bitar bundna till en icke-kodande region. Dessa typer av vektorer används vanligtvis för fusionsproteiner. Fusionsproteiner tillverkas av bitar av DNA som normalt inte är anslutna. De placeras i samma vektor för enklare transfektion.
Alla vektorer har en eller flera olika taggar på dem. Dessa taggar används för igenkänning under ett reningssteg i den rekombinanta proteinproduktionsprocessen. När en lösning som innehåller vektorer hälls över en speciell kolumn, klistrar taggarna till kolonnen på olika platser och kan separeras från andra delar av DNA: t. Detta säkerställer att rätt DNA och vektorer sätts in i värden.
Efter transfektion av värden kan den sedan delas upp och börja producera det önskade rekombinanta proteinet. Dessa värdceller kan odlas i laboratorieinställning och proteinet kan samlas upp när det produceras. Dessa proteiner renas sedan för användning i människor eller andra däggdjur. Bakteriella värdar producerar ofta inte alla delar av det humana proteinet. Dessa proteiner kan modifieras i labbet efter rening.