Vad är ett transfektionsreagens?

Ett transfektionsreagens är en bärare för DNA som en forskare kan använda för att införa DNA i celler i kultur. Ett antal typer av reagenser finns tillgängliga genom life science-företag, och forskare kan också utveckla sina egna för anpassade applikationer. Dessa molekyler kan arbeta på ett antal olika sätt för att transportera DNA i målcellerna och infoga det i deras genom. Den typiska processen involverar att man blandar önskat DNA med reagenset, tillsätter det till celler i kultur, inkuberar dem och sedan screenar dem för att se vilket som innehåller det nya DNA: t.

DNA-transfektion är ett mycket viktigt forskningsverktyg. Forskare kan infoga genetiskt material för att aktivera gener eller tystna dem och kan använda transfektion för att tvinga celler i kulturen att utföra på ett visst sätt. Målet kan vara kortvarigt genetiskt uttryck för studiens syfte. Det kan också vara en permanent modifiering som gör det möjligt för forskaren att skapa en koloni av klonade celler som alla uttrycker samma gen. Dessa celler kan användas i forskning och kan ha terapeutiska tillämpningar.

Kalciumfosfat är ett av de äldsta transfektionsreagensen. Forskare använder också lipidbaserade material, som tenderar att vara mycket effektiva. De kan också använda virala DNA-vektorer såväl som mekaniska metoder som mikroinjektion, där önskat DNA injiceras direkt för att minska risken för att försämra materialet. Genpistoler är ett annat populärt verktyg för DNA-transfektion.

När en forskare väljer ett transfektionsreagens finns det ett antal överväganden. Dessa inkluderar hur reagenset kommer att användas, vilken typ av DNA är involverat och vilken typ av effekter forskaren vill ha. Transfektionsreagenset är inte alltid helt pålitligt, och forskaren behöver också ett bra screeningsverktyg för att hitta och isolera de framgångsrikt transfekterade cellerna. Detta kommer att göra det möjligt för forskarna att kassera celler som inte accepterar det nya genetiska materialet tillsammans med celler som gjorde det, men uttrycker det på ett ovanligt sätt som antyder att någon nedbrytning av DNA kan ha inträffat.

DNA-transfektionsreagenslistor är tillgängliga från life science-företag. De flesta har ett diagram för att hjälpa forskare att bestämma vilka de ska använda, på grundval av celltyp och vilken typ av genetiskt material forskaren vill infoga. Forskare kan vanligtvis begära prov för att tillåta dem att testa ett reagens innan de förbinder sig att använda det i forskning. Det är viktigt att läsa dokumentationen noggrant för att säkerställa att transfektionsreagensens funktion är fullständigt förstås före användning.