Vad är en elektroforetisk mobilitetsskiftanalys?
En analys är ett test som är utformat för att separera en cell ursprungliga delar i delar som är lätta att identifiera. Elektroforetisk mobilitetsskiftanalys är ett experiment som använder elektricitet för att flytta makromolekyler, liksom proteiner, genom en gelmatris för att orsaka en åtskillnad mellan de olika makromolekylerna baserade på storlek. Liksom ett bilbatteri är de negativa och positiva ändarna på motsatta sidor av den elektroforetiska rörlighetsskiftanalysen, eller gelskiftanalys. Detta får elektricitet att locka till sig makromolekyler baserat på laddning. Varje makromolekyl rör sig i en annan takt, eftersom mindre upplever mindre störningar från gelén.
Flera steg krävs för att ställa in en elektroforetisk mobilitetsskiftanalys. Makromolekylerna som måste separeras måste förberedas först. De flesta makromolekyler erhålls från levande celler och kräver specifika procedurer. Att få delarna som ska separeras kräver ofta en centrifug och en kemisk reaktion som bryter ned cellerna. Centrifugen kommer att snurra ett injektionsflaska med hög hastighet och bilda en pellet av de makromolekyler som behövs. Detta upplöses och ofta läggs en färg eller annan etikett till för att spåra gelskiftanalysen.
Gelén, ibland kallad bädden, måste också vara nytillverkad av en exakt blandning av pulveriserad agaros och vatten som snabbt förvandlas från vätska till gel. Vanligtvis kommer en elektroforetisk mobilitetsskiftanalys att ha flera banor för separata analyser, som används för att jämföra olika makromolekylblandningar. En körfält är alltid inställd som en kontroll och har vanligtvis bara en typ av makromolekyl.
Strömkällan ska väljas noggrant och inte anslutas förrän allt är klart. Hur lång tid strömmen är på bestämmer mobilitetsförskjutningen för makromolekylerna. Det är viktigt att separera bitarna tillräckligt för korrekt analys. Om strömmen inte är korrekt inställd kommer framtida jämförelser också att vara felaktiga. Makromolekylernas riktning kommer att bestämmas av vilken laddning de har naturligt - de flesta rör sig mot det negativa slutet.
Enkla genetiska tester och proteinanalyser görs vanligtvis med en elektroforetisk mobilitetsskiftanalys. Detta visas med olika växlingar i olika körfält. Om en interaktion inträffar, kombineras makromolekylerna och körs långsammare genom matrisen jämfört med kontrollfältet med endast en makromolekyl. Gelskiftanalyser används för att snabbt eliminera eller bekräfta genetiska resultat som komplicerade metoder kan ta längre tid att slutföra. De kan också avgöra om antikroppar, en immunsystemmakromolekyl, klistrar sig till proteiner som kan användas för att bekämpa bakterier och virus.