Vad är en ELISA-analys?
En ELISA-analys är en testprocess som upptäcker ämnen för att identifiera vissa sjukdomar, allergier och olagliga droger i kroppen. Det är också känt att det används för att detektera humant immunbristvirus (HIV). Några av de ämnen det kan upptäcka är antikroppar, hormoner och proteiner. Huvudprincipen bakom ELISA-analysen är att en kemisk reaktion mellan en patients vätskeprov och ett specifikt laboratorieprov indikerar närvaron av ett visst ämne associerat med en specifik sjukdom eller medicinskt tillstånd. ELISA, som en förkortning, står för "enzymbunden immunosorbentanalys."
Uppfinningen och utvecklingen av ELISA-analysen berodde på att det fanns ett behov av en säkrare testmetod än radioimmunanalysen, som använder radioaktivitet för att producera en kemisk reaktion. På 1960-talet lyckades två separata forskargrupper ledda av Stratis Avrameas och GB Pierce lyckas med att samarbeta vissa antikroppar med vissa enzymer och producera en kemisk reaktion från kombinationen. Med denna kunskap till hands uppfann två forskare från Stockholms universitet, Peter Perlmann och Eva Engvall, ELISA-metoden och publicerade sina experiment och systemet bakom analysen 1971. Sedan dess har ELISA-analysen använts över hela världen, även om radioimmunanalysen är fortfarande tillgänglig på grund av dess lägre kostnad.
Det finns två vanliga typer av ELISA-analys: den direkta och den indirekta metoden, den senare används oftare. Det första steget skulle vara att extrahera ett prov från patienten, vanligtvis blod eller urin, som båda kan genomgå en separationsprocess för att extrahera det klara serum som innehåller antikropparna. Ett ELISA-kit innehåller ofta en platta som innehåller 96 mini-behållare som kallas ”brunnar”, som kommer att beläggas med ett antigen som möjligen kan ha en reaktion på en nuvarande antikropp. Ett antigen anses ofta vara ett främmande ämne som kroppen angriper genom att producera specifika antikroppar, så om en patient har förvärvat ett antigen från en viss sjukdom, bör hans serum innehålla antikroppar som motsvarar nämnda antigen.
Patientens serum hälls sedan i brunnarna och inkuberas sedan för att låta antikropparna fästa vid proteinbeläggningen. Efter inkubationsperioden sköljs brunnarna av för att avlägsna resten av serumet och andra antikroppar som inte har bundit till beläggningen. En annan uppsättning antikroppar extraherade från djur, vanligtvis råttor, hälls i brunnarna för att detektera de mänskliga antikropparna, och en annan inkubationsperiod äger rum och djurantikropparna kommer att tvättas bort igen. Ett enzymsubstrat kommer sedan att tillsättas så att reaktionen syns synligt i färger. Vanligtvis kommer en stark färgskärm att indikera ett positivt resultat, vilket innebär att patienten har sjukdomen eller andra medicinska tillstånd testade för.