Vad är en intern standard?
En intern standard är en känd mängd kemikalie som läggs till i ett analytiskt prov, som gör det möjligt för tekniker att kalibrera laboratorieinstrument. Detta möjliggör också beräkningen av mängder okända kemikalier, eftersom instrumentet visar mängden av den kända standarden som referens. Tester som kan dra nytta av en intern standard inkluderar gas- och vätskekromatografi.
gaskromatografi passerar ett förångat prov genom en kolonn packad med en solid, mycket ren form av jord. Provet flyttas genom kolonnen med en inert eller icke-reaktiv gas som kväve eller argon. Olika molekyler absorberar på kolonnen och frigörs sedan baserat på deras molekylstruktur. Gasen bär sedan det separerade provet till en låga för att skapa joner eller molekyler med små elektriska laddningar. En detektor bestämmer mängden för varje jon och plottar resultaten på ett diagram.
vätskekromatografi separerar också prover i olika molekyler, men använder ett flytande lösningsmedel tillFlytta provet med tyngdkraft eller tryck över ett stationärt material. Ett kromatografibäddsmaterial kan vara ett harts, kiselhaltig jord eller till och med en annan vätska. Provet laddas överst och lösningsmedel tillsätts för att trycka ner provet genom kolonnmaterialet.
Delar av provet kommer att passera genom kolonnen i olika hastigheter baserat på molekylära eller joniska egenskaper. Små vätskeprover, kallade alikvoter, tas med regelbundna intervall från botten av kolonnen. Dessa prover kommer att innehålla de olika molekylerna som har separerat i kolonnen och analyseras för att bestämma deras sammansättning.
I båda typerna av kromatografi kan många variabler påverka resultaten. Flödeshastigheten för bärgas kan förändras något, eller kolumner kan vara vid olika temperaturer för olika prover. Att lägga till en kalibrerad intern standard ger ett känt resultat för alla prov placerade itestinstrumentet. Om någon variabel i instrumentet, såsom gasflödeshastighet, ändras med en liten procentandel, kommer standarden att ändras med samma mängd.
När instrumentet har kalibrerats genom att köra ett prov med den interna standarden kan ett okänt kemiskt prov köras genom samma instrument, med standarden inkluderad. Resultaten visar den kemiska sammansättningen av det okända, plus den interna standarden, planerad på grafen som skapats av instrumentet. Genom att känna till mängden intern standard kan den relativa mängden okänd kemikalie bestämmas, vilket möjliggör en beräkning av koncentrationen.
Det är viktigt att notera att en intern standard inte används för att kemiskt reagera med något prov. Snarare används det för att jämföra molekyler av allt okänt material med den kända mängden av standarden. Denna teknik är känd som att ställa in en variabel, eftersom den kända standarden alltid kommer att förbli densamma från prov till prov, oavsett annat tillstånds som kan förändras.