Vad är en intern standard?
En intern standard är en känd mängd kemikalie som läggs till ett analytiskt prov, vilket gör det möjligt för tekniker att kalibrera laboratorieinstrument. Detta möjliggör också beräkning av mängder okända kemikalier, eftersom instrumentet visar mängden känd standard som referens. Tester som kan dra nytta av en intern standard inkluderar gas- och vätskekromatografi.
Gaskromatografi passerar ett förångat prov genom en kolonn packad med en fast, mycket ren form av jord. Provet förflyttas genom kolonnen med en inert eller icke-reaktiv gas, såsom kväve eller argon. Olika molekyler absorberas i kolonnen och släpps sedan ut baserat på deras molekylstruktur. Gasen bär sedan det separerade provet till en låga för att skapa joner, eller molekyler med små elektriska laddningar. En detektor bestämmer mängden av varje jon och plottar resultaten på ett diagram.
Flytande kromatografi separerar också prover i olika molekyler, men använder ett flytande lösningsmedel för att förflytta provet genom tyngdkraft eller tryck över ett stationärt material. Ett kromatografibäddmaterial kan vara ett harts, kiselgur eller till och med annan vätska. Provet laddas upptill, och lösningsmedel tillsättes för att pressa provet ner genom kolonnmaterialet.
Delar av provet kommer att passera genom kolonnen med olika hastigheter baserade på molekylära eller joniska egenskaper. Små vätskeprover, kallad alikvoter, tas med jämna mellanrum från kolonnens botten. Dessa prover innehåller de olika molekylerna som har separerats i kolonnen och analyseras för att bestämma deras sammansättning.
I båda typerna av kromatografi kan många variabler påverka resultaten. Flödeshastigheten för bärgasen kan förändras något, eller kolumner kan vara vid olika temperaturer för olika prover. Att lägga till en kalibrerad intern standard ger ett känt resultat för alla prov som placeras i testinstrumentet. Om någon variabel i instrumentet, som gasflödeshastighet, ändras med en liten procentandel, kommer standarden att ändras med samma mängd.
När instrumentet har kalibrerats genom att köra ett prov med den interna standarden, kan ett okänt kemiskt prov köras genom samma instrument, med standard inkluderad. Resultaten visar den kemiska sammansättningen av det okända, plus den interna standarden, ritad på diagrammet skapat av instrumentet. Genom att känna till mängden intern standard kan den relativa mängden okänd kemikalie bestämmas, vilket möjliggör en beräkning av koncentrationen.
Det är viktigt att notera att en intern standard inte används för att kemiskt reagera med något prov. Snarare används det för att jämföra molekyler av allt okänt material med den kända mängden standard. Denna teknik är känd som att sätta en variabel, eftersom den kända standarden alltid kommer att förbli densamma från prov till prov, oavsett andra förhållanden som kan förändras.