Vad är antikroppsfärgning?

Antikroppfärgning är en laboratorieprocedur som används för att färga ett prov för att upptäcka närvaron av vissa antigener i ett prov eller för att markera antigen så att de kan ses tydligt. Det finns ett antal olika antikroppsfärgningsförfaranden som kan användas, beroende på provet och teknikerens preferens. Denna teknik undervisas på högskolan och universitetsnivå i många regioner, och i gymnasieskolor med avancerade vetenskapsprogram kan studenter också lära sig antikroppfärgning.

Vid antikroppfärgning introduceras en antikropp till ett prov såsom skrotning eller biopsi. Om det finns antigen i provet som antikroppen kommer att reagera på, låses den fast vid dem. När provet tvättas, kommer överskottet av antikroppar att tvättas bort, vilket lämnar kvar antikropparna som låsts fast vid provet. Om forskaren använder konjugerade antikroppar med bifogade fluorescerande taggar tänds provet under korrekt belysning och förråder närvaron av antikropparna i fråga.

I andra fall måste människor använda en sekundär antikropp. Efter tvättning av provet tillsätter de den sekundära antikroppen, ett preparat med en fluorescerande tagg bifogad. Den sekundära antikroppen fäster sig vid de primära antikropparna i provet och fluorescerar under ljus såsom diskuterats ovan. Fluorescensen kan användas vid diagnos av sjukdom, med laboratorietekniker som kontrollerar prover för antigener associerade med specifika sjukdomar, och den kan också användas för att leta efter tecken på kontaminering och för att identifiera förekomsten av antigener av andra skäl.

Vid mikroskopi kan antikroppfärgning ibland vara till hjälp för att belysa vissa strukturer. Även med utmärkt upplösning kan mikroskopi ibland vara svårt att se, och det kan vara utmanande att välja dolda eller små strukturer i bilden. Genom att använda antikroppfärgning gör det möjligt för människor att skapa en flagga för att enkelt identifiera och beskriva strukturer av intresse, såsom vissa vävnadstyper eller strukturer i cellerna. Fluorescensen kommer att ses på alla platser på objektglaset där antikroppen av intresse är närvarande, kartläggning av strukturer i provet.

Antikroppsfärgning kräver tillgång till laboratorieutrustning, antikroppar och olika lösningar som används under fixeringen och bevarandet av prover. Det är viktigt att utföra proceduren korrekt för att undvika förorening och misstag som att låta lösningar sitta på ett prov för länge, dölja eller förvirra resultaten. Många laboratorier har en manual som deras anställda följer, och när de förbereder material för forskning kommer folk att beskriva sina metoder i detalj så att deras arbete kan replikeras.