Vad är cellcykelanalys?

cellcykelanalys är en teknik som används i biokemisk forskning för att identifiera och analysera fasen för en biologisk cell. Under sin livstid passerar en cell genom en serie cykliska faser som kollektivt kallas cellcykeln. Mängden deoxyribonukleinsyra (DNA) i cellen förändras baserat på fasen. I cellcykelanalys färgas cellens DNA med ett fluorescerande färgämne, vilket gör att forskare kan bestämma hur mycket av DNA som finns och var cellen är i sin cykel.

cellcykeln består av två breda faser: interfas och mitos. Interfas består av beredning för uppdelningen av cellen eller mitos, som också kallas M -fasen. Det mesta av cellens livscykel spenderas för att förbereda för mitos, vilket är kort i jämförelse, så interfas delas upp i tre delar: G1 -fas, S -fas och G2 -fas.

I G1 är cellen främst upptagen av tillväxt. Under S -fasen är cellens genetiska information i form av DNA RePlicerad som förberedelse för sin uppdelning i två dotterceller. I G2 förbereder cellen för uppdelning och leder in i M -fasen. Efter mitos återgår cellen till G1 -avsnittet i interfasen och cykeln börjar igen. Celler som av någon anledning slutar dela lämnar cykeln och existerar inert i det som kallas G0 -fasen.

cellen replikerar sitt DNA under S -fasen, så det finns dubbelt så mycket DNA i cellen under G2 och M än det finns i G1 eller G0. Forskare använder denna information i cellcykelanalys för att bestämma cellfasen. Cellcykelanalys kan också avslöja avvikelser i cellulärt DNA.

Tekniken som används i cellcykelanalys kallas flödescytometri. Först införs ett fluorescerande färgämne i cellen som fläckar DNA -molekylerna genom kemiskt bindande till dem. Forskare använder sedan ett instrument som kallas en cytometer för att bestämma intensiteten hosCells fluorescens. En högre fluorescens indikerar att mer färgämne kunde binda, och det visar att det finns mer DNA i cellen.

Vanligtvis används cellcykelanalys vid en gruppering av celler. En typ av diagram som kallas ett histogram genereras från data, som ofta visar två distinkta toppar: en som visar populationen av celler i G1 -fasen, och en annan - dubbelt så hög - visar de i G2 -fasen. G2 -fasstoppen är dubbelt så hög eftersom cellerna i den populationen innehåller dubbelt så mycket som DNA som de i G1 -toppen. Celler som finns i S -fasen, som fortfarande håller på att replikera DNA, dyker upp på grafen på en mellanliggande nivå mellan de två topparna.