Vad är restriktionsfragmentlängd polymorfism?
En restriktionsfragmentlängd polymorfism, eller RFLP, är en variation i homologa DNA -sekvenser. Polymorfismer är variationerna i homologt DNA som förekommer mellan individer, medan termen restriktion hänvisar till det faktum att små delar av DNA kan skäras från en stor bit med restriktionsenzymer. Vissa DNA -sektioner har mer variation än andra, och sektioner med en hög grad av variation är användbara vid begränsning av polymorfismanalysen för begränsningar. Denna klass av enzym finns i många bakteriearter. I en bakterie är rollen för restriktionsendonukleaser att ge skydd mot utländskt DNA som får tillgång till genom att bryta det i bitar. I molekylär forskning kan restriktionsenzymer användas för att fragmentera DNA på kända variationsplatser så att de resulterande fragmenten kan analyseras.
Varje typ av enzym känner igen en specifik DNA -bas PAIr sekvens och verkar för att klyva DNA -molekylen när som helst där den känner igen sekvensen. Bakterier skyddar sitt eget DNA från att brytas med ett distinkt mönster av DNA -metylering som förhindrar restriktionsendonukleaser från bindning. Mer än 800 olika restriktionsendonukleaser har upptäckts, som tillsammans känner igen mer än 100 unika nukleotidsekvenser. De flesta igenkända sekvenser är mellan fyra och sex baspar i längd.
restriktionsenzymer används i bioteknik för att analysera restriktionsfragmentlängd polymorfism av olika skäl. Enzymerna används för att skära DNA -längder vid vissa sekvenser så att skillnaderna mellan individer kan undersökas. Lösningar av fragmenterat DNA, skärt vid vissa kända nukleotidsekvenser, hybridiseras med sonder utformade för att detektera fördefinierade DNA-sekvenser. Proverna analyseras sedan med användning av gelelektrofores.Denna teknik producerar en gel med flera band med mörk färgning, som var och en representerar ett annat DNA -fragment. Genom att undersöka färgningsmönstret kan forskare bestämma mönstret för RFLP som finns i ett prov.
polymorfismer förekommer allmänt genom det mänskliga genomet, och analys av dessa har bevisat att olika grupper av människor tenderar att dela RFLP: er gemensamt. Vissa RFLP -typer är vanliga för människor med olika etniska grupper eller geografiska ursprung, till exempel, och koppling finns också inom familjära grupper. Denna variation finns i hela djurriket, vilket gör det till ett användbart forskningsverktyg inte bara för att spåra mänskliga förfäder, utan också för att studera vilda djurmigration och evolution.
Analys av restriktionsfragmentlängd Polymorfismer kan ge användbar information för kliniska och medicinska ändamål. Begränsningsfragmentlängd Polymorfismprober används i faderskapstester, vid diagnos av ärftliga sjukdomar, i kriminalteknisk vetenskap och i genotypning. AnaLyzing -mönster av RFLP över ett helt genom är grunden för DNA -fingeravtryck, tekniken som är underbyggnaden av alla dessa olika användningsområden.