Vad är Western Blot?

En Western blot är en laboratorieanalyssteknik som används för att isolera proteiner. Det kan användas vid diagnos av vissa sjukdomar, och även i forskning om olika proteiner och processer. Bekant är den västra fläcken kopplad till diagnos av HIV-infektion, men den kan också användas för att leta efter spår av bovin spongiform encefalit (BSE) och Lyme-sjukdom. Prover som skickas ut för testning med Western blot-protokoll kan returnera resultaten inom några dagar till flera veckor, beroende på laboratoriekapacitet och brådskande.

I en western blot placeras provet, som kan vara från blod eller vävnad, först genom elektrofores så att proteinerna kommer att separera ut efter längd. En remsa av elektroforesgel med isolerade proteiner med mållängden kan användas för att överföra proteinerna till ett nitrocellulosasubstrat för nästa steg i testet. Under detta steg introduceras en antikropp i provet med målet att märka proteinerna med antigener som den antikroppen låser fast vid.

När proteinerna har taggats kan de lätt identifieras. När det gäller testning för sjukdom indikerar närvaron av ett reaktivt protein att provet har testat positivt. Western blots returnerar sällan falska positiver, även om det kan hända ibland, och de kan också returnera falska negativa, där en person faktiskt har en sjukdom, men det visas inte på Western blot-tester. Detta kan vara särskilt vanligt i fall då det sjukdomsframkallande medlet ännu inte börjat replikera.

Forskare kan använda resultaten för att identifiera specifika proteiner som de spårar och för en mängd andra ändamål. Att förstå hur Western blot-protokollet fungerar är en viktig färdighet för vissa forskare och laboratorietekniker, eftersom de måste kunna ge pålitliga och pålitliga resultat med denna metod. Labfärdigheter inklusive att lära sig att hantera komplicerade eller dåliga prover och hur man undviker förorening under processen så att resultaten av testet är kända för att vara sanna.

Denna teknik är ibland känd som en immunoblot, eftersom de önskade proteinerna väsentligen "blotting" med antikroppar så att de kommer att dyka upp. Detta test kan användas för att leta efter proteiner hos alla djur, inte bara människor, med veterinärer som ofta använder Western blot-testet för att avgöra om en besättning av kor har infekterats eller utsatts för BSE eller inte.