แอนติบอดี้ไบโอตินคืออะไร?

ตรงกันข้ามกับสิ่งแรกที่คิดว่าแอนติบอดีไบโอตินไม่ได้เป็นสารที่ถูกยกขึ้นกับไบโอติน แอนติบอดี้ไบโอตินเป็นแอนติบอดีที่ผัน กลับไปสู่ ไบโอติน ไบโอตินผูกกับลิแกนด์อย่างแรง - avidin - ซึ่งสามารถแปรเปลี่ยนเป็นโมเลกุลที่ตรวจจับแสงได้เช่นฟลูออโรฟอร์เรส ไบโอตินและอะวิดินเป็นหนึ่งในพันธะโควาเลนต์ที่มีความเกี่ยวข้องทางชีวภาพที่แข็งแกร่งที่สุดซึ่งทำให้ลิแกนด์ / ตัวรับ / ไบโอตินและรีวิด - คอนจูเกตเป็นประโยชน์อย่างยิ่งในการศึกษาทางวิทยาศาสตร์

ไบโอตินเป็นวิตามินบีรวม - วิตามินบี 7 มันเป็นโมเลกุลขนาดเล็กที่โมเลกุลไบโอตินหลายอันสามารถนำมารวมกันเป็นโมโนโคลนอลหรือโพลีโคลนอลแอนติบอดี ความจริงที่ว่าไบโอตินยังสามารถละลายในน้ำได้ช่วยให้มีความยืดหยุ่นในระบบบัฟเฟอร์มากกว่าถ้าไม่ละลายน้ำ สำหรับความจำเพาะที่มากกว่านั้นโมโนคอลนัลแอนติบอดีจะเปลี่ยนไปเป็นไบโอตินซึ่งมักจะแนะนำให้ใช้มากกว่า โมเลกุลไบโอตินสามารถผูกมัดโดยตรงกับแอนติบอดีที่น่าสนใจหรือสามารถเชื่อมโยงผ่านหางโมเลกุลเพื่อให้อิสระในการเคลื่อนไหวมากขึ้น

biotin ligand avidin พบในไข่อัลบูมิน มันสามารถทำในราคาถูกและแยกได้ง่าย โมเลกุลของอาวิดินหลายตัวจะจับกับตัวรับไบโอตินแต่ละตัวเพื่อขยายสัญญาณการตรวจจับแอนติบอดีเดี่ยว เมื่อแอนติบอดีไบโอตินยึดติดกับแอนติเจนที่น่าสนใจผู้ทดลองสามารถแสดงให้เห็นถึงความซับซ้อนเพื่อ avidin ผันไปยังฟลูออโรฟอร์ทำให้การตรวจจับที่ซับซ้อน ผ่านการถ่ายภาพด้วยแสงฟลูออไรด์แอนติบอดีไบโอตินและลิแกนด์ avidin-conjugated สามารถตรวจพบได้ด้วยกล้องจุลทรรศน์แสงและแอนติเจนที่น่าสนใจสามารถศึกษาได้ ในแหล่งกำเนิด

แม้ว่าการสร้างและการใช้ไบโอตินแอนติบอดีและโมเลกุลอะวิดินที่ติดแท็กเรืองแสงเป็นวิธีการทั่วไปในการตรวจหาแอนติเจน แต่ก็มีทางเลือกอื่นที่ยังคงใช้ประโยชน์จากไบโอติน / อะวิดินที่ซับซ้อน การผูกไบโอตินกับลิแกนด์เช่นนิวโรทอกซินนั้นจะเป็นประโยชน์ในการตรวจจับการวางตัวรับของเซลล์ประสาทที่ได้รับผลกระทบจากนิวโรทอกซินในคำถาม. นอกจากนี้ยังเป็นไปได้ที่จะผัน biotin ไปเป็นลำดับนิวคลีโอไทด์เช่น messenger ribonucleic acid (mRNA) เพื่อค้นหาตำแหน่งที่ลำดับนิวคลีโอไทด์เหล่านี้ถูกแปลเป็นโปรตีนหรือตรวจจับการควบคุม mRNA ของเซลล์

มีความเป็นไปได้ที่จะซื้อแอนติบอดี้ไบโอไทซิเนตหรือโพลีโคลนอลแอนติบอดีแม้ว่าการผลิตแอนติบอดี้ไบโอไททาเนตจะอยู่ในความสามารถของผู้ทดลองหลายคน โปรโตคอลสามารถพบได้ออนไลน์แนะนำวิธีการ biotinylation แอนติบอดีแม้ว่าโปรโตคอลที่ติดตามได้ง่ายที่สุดเชื่อมโยงไบโอตินโดยตรงกับแอนติบอดีแทนที่จะแนะนำวิธี intercalate spacer โมเลกุล spacers โมเลกุลระหว่างไบโอตินและแอนติบอดีที่เกี่ยวข้องช่วยให้ระยะห่างที่มากขึ้นในการแสดงโมเลกุลมากขึ้นไปยังเว็บไซต์ที่มีผลผูกพันและแอนติบอดีไบโอตินเหล่านี้มักจะซื้อมากกว่าที่ทำ