immunosorbent assay (ELISA) เป็นการทดสอบทั่วไปที่ใช้ในระบบภูมิคุ้มกันเพื่อตรวจหาแอนติเจนหรือแอนติบอดี แอนติเจนกระตุ้นปฏิกิริยาของระบบภูมิคุ้มกัน - พูดอีกอย่างก็คือพวกมันก่อให้เกิดความเจ็บป่วย ELISA ใช้เพื่อตรวจหาแบคทีเรียและแอนติเจนของไวรัสหลายชนิดรวมถึงไวรัสเอชไอวี (Human Immunodeficiency Virus, HIV) มาลาเรียอหิวาตกโรคโรคหัดและคางทูม โปรโตคอล ELISA ที่ แตกต่างกันเล็กน้อยสามารถใช้ในการตรวจจับแอนติบอดีต่อสิ่งเหล่านี้และเชื้อโรคอื่น ๆ อีกมากมาย โปรโตคอล ELISA เป็นกระบวนการทีละขั้นตอนสำหรับการดำเนินการ ELISA ที่เฉพาะเจาะจง
แม้ว่าโปรโตคอล ELISA จะแตกต่างกันเล็กน้อยขึ้นอยู่กับประเภทของ ELISA ที่กำลังดำเนินการอยู่แนวคิดพื้นฐานก็เหมือนกันสำหรับพวกเขาทั้งหมด ELISA ขึ้นอยู่กับแอนติบอดี้ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์หรือที่เรียกว่าแอนติโกล บู ลิน โมเลกุลสัญญาณที่ติดอยู่กับแอนติโกลบูลินเหล่านี้จะทำให้เกิดการเพิ่มสารตั้งต้นในระหว่างการทดสอบเพื่อเปลี่ยนสีถ้ามีแอนติเจนหรือแอนติบอดีที่ต้องการอยู่ ปริมาณของแอนติเจนหรือแอนติบอดีที่มีอยู่นั้นเป็นสัดส่วนกับปริมาณการเปลี่ยนสีซึ่งสามารถวัดได้ด้วยเครื่องอ่านแผ่นอิเล็กทรอนิกส์
ELISA มีสามประเภทหลัก ELISA โดยตรง มักใช้ในการตรวจหาแอนติเจนมากกว่าแอนติบอดี นี่เป็นโปรโตคอล ELISA ที่ง่ายที่สุดเนื่องจากแอนติบอดีที่เชื่อมโยงกับเอ็นไซม์ผูกกับแอนติเจนที่ต้องการโดยตรง จากนั้นจึงเพิ่มสารตั้งต้นเพื่อกำหนดปริมาณของแอนติเจนที่มีอยู่
ELISA ทางอ้อม ถูกใช้เพื่อตรวจจับแอนติบอดีในขณะที่ ELISA ทางอ้อมอีกชนิดหนึ่งที่เรียกว่า แซนด์วิช ELISA สามารถใช้ตรวจหาแอนติเจน โปรโตคอล ELISA แซนวิชต้องใช้สองแอนติบอดีเรียกว่าการจับและตรวจจับแอนติบอดีเพื่อผูกกับแอนติเจนที่ต้องการ เพิ่มแอนติโกลบูลินซึ่งจับกับแอนติบอดี้ตรวจจับและเพิ่มสารตั้งต้น ELISA ทางอ้อมทำตามโปรโตคอลที่คล้ายกัน แต่ใช้แอนติเจนจับมากกว่าแอนติบอดี้จับเพื่อตรวจหาแอนติบอดีที่ต้องการ
การแข่งขัน ELISA มักใช้สำหรับการตรวจหาแอนติเจนที่มีความเข้มข้นต่ำเนื่องจากเป็นวิธีการตรวจที่ไวต่อการสัมผัส ตรงกันข้ามกับโปรโตคอล ELISA อื่น ๆ การแข่งขัน ELISA ใช้แอนติเจนที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์แทนแอนติบอดีและวิธีการหาปริมาณที่แตกต่างกันเล็กน้อย ในนั้นตัวอย่างที่มีแอนติเจนที่จะตรวจพบและแอนติเจนที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์จะถูกเพิ่มเข้าไปในแอนติบอดีและแอนติเจนทั้งสองจะแข่งขันกันเพื่อหาแอนติบอดี เมื่อเพิ่มสารตั้งต้นการเปลี่ยนสีจะยิ่งใหญ่กว่าโดยมีอัตราส่วนที่สูงขึ้นของแอนติเจนที่เชื่อมโยงกับเอ็นไซม์ที่ถูกผูกไว้กับแอนติเจนตัวอย่างที่ถูกจับ ซึ่งหมายความว่าการตรวจจับการเปลี่ยนสีที่สูงขึ้นจะลดลงเมื่อความเข้มข้นของแอนติเจนตัวอย่างลดลงซึ่งเป็นสิ่งที่ทำให้วิธีนี้มีความไวสูง
