แรงดันลบในห้องเป็นโรงพยาบาลเทคนิคการแยกและห้องปฏิบัติการสามารถใช้เพื่อควบคุมสภาพแวดล้อมที่อาจมีสารปนเปื้อน สารปนเปื้อนในอากาศในห้องจะอยู่ภายใต้การควบคุมในห้องที่มีแรงดันลบแทนที่จะรั่วไหลออกสู่ส่วนที่เหลือของสถานที่ ในโรงพยาบาลนี่เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับห้องแยกผู้ป่วยเมื่อผู้ป่วยมีเงื่อนไขเช่นวัณโรคและอาจแพร่กระจายโรคในห้องปกติหรือบนหอผู้ป่วยเปิด แล็บยังสามารถพึ่งพาห้องแรงดันลบเพื่อประกันความเสี่ยงทางชีวภาพและเคมีบางประเภท
แนวคิดนี้อาศัยความจริงที่ว่าอากาศจะเคลื่อนที่จากบริเวณที่มีแรงดันสูงไปยังพื้นที่ที่มีแรงดันต่ำ ความกดอากาศต้องการที่จะทำให้เท่ากันและอากาศจะเคลื่อนที่ต่อไปจนกว่าความดันจะทรงตัว ด้วยแรงดันห้องลบระบบระบายอากาศจะเคลื่อนย้ายอากาศออกเร็วกว่าอากาศที่สามารถเข้าไปได้สิ่งนี้สร้างแรงกดดันด้านลบและกระตุ้นให้อากาศจากห้องโถงและห้องข้างเคียงไหลเข้าสู่ห้องแรงดันลบ
อากาศหมุนเวียนในห้องแรงดันลบประมาณ 12 ครั้งต่อชั่วโมงเพื่อให้อากาศสดชื่นและระบายอากาศได้ อากาศที่ระบายออกจากห้องจะเคลื่อนที่ผ่านระบบการกรองที่ดึงสิ่งปนเปื้อนออกมาและระบายอากาศออกสู่สิ่งแวดล้อมโดยรอบอย่างปลอดภัย อันตรายทางชีวภาพหลายอย่างมีความไวต่อแสงอุลตร้าไวโอเล็ตมากและจะสลายอย่างรวดเร็วทันทีที่ช่องอากาศเข้าสู่ภายนอก ระบบระบายความดันในห้องติดลบอาจระบายไปยังหลังคาหรือบริเวณที่มีการค้ามนุษย์ไม่บ่อยนักเพื่อให้แน่ใจว่าทุกอย่างพังทลายลงก่อนที่จะสัมผัสกับคนที่อาจมีความเสี่ยง
ด้วยความดันห้องติดลบจึงเป็นเรื่องยากมากสำหรับสิ่งปนเปื้อนในห้องที่จะเดินทางไปยังส่วนอื่น ๆ ผู้ให้บริการด้านการดูแลสุขภาพและนักวิจัยสามารถเคลื่อนย้ายได้อย่างอิสระเกี่ยวกับห้องและมักจะพึ่งพาห้องเล็ก ๆ ระหว่างห้องกับสภาพแวดล้อมโดยรอบเพื่อลดการหยุดชะงักของความดันที่เกิดจากการเปิดและปิดประตู หลังจากทำงานในห้องแล้วอาจจำเป็นต้องลดการปนเปื้อนเปลี่ยนเสื้อผ้าหรือทำตามขั้นตอนอื่น ๆ เพื่อปกป้องสุขภาพและความปลอดภัย
ผู้ป่วยในสภาพแวดล้อมที่มีความดันลบในห้องไม่ควรสังเกตอะไรผิดปกติ ระบบระบายอากาศนั้นสุขุมและจะไม่รบกวนการนอนหลับหรือการสนทนา การเปลี่ยนแปลงของอากาศเป็นประจำทำให้สภาพแวดล้อมสดชื่นและตัวกรองอาจทำการหมุนเวียนอากาศ หากห้องเริ่มรู้สึกอับหรือใกล้เคียงอาจเป็นสัญญาณบ่งบอกว่าระบบระบายอากาศทำงานไม่ถูกต้องและช่างเทคนิคควรประเมินและทำการปรับแต่งหรือซ่อมแซมที่จำเป็น


