การทดสอบ Pyrogen กำหนดกระบวนการที่ผู้ผลิตยาใช้เพื่อตรวจสอบว่ามีสารพิษจากแบคทีเรียในวัคซีนและยาที่อาจทำให้เกิดไข้เมื่อใช้กับมนุษย์หรือไม่ มันจะตรวจสอบว่าจุลินทรีย์หรือสารที่มีอยู่ในสารละลายทางหลอดเลือดดำในระหว่างกระบวนการผลิต การทดสอบ pyrogen ในรูปแบบที่ธรรมดาที่สุดและเก่าที่สุดประกอบด้วยการฉีดยาเข้าไปในกระต่ายเพื่อตัดสินว่ามีไข้หรือไม่ การทดสอบที่ใหม่กว่านั้นใช้เลือดจากปูเกือกม้าเพื่อทดสอบสารพิษ
วิธีการทดสอบกระต่าย pyrogen โผล่ขึ้นมาในปี 1940 หลังจากที่ผู้ป่วยบางรายกลายเป็นป่วยจากยาทางหลอดเลือดดำ อุปกรณ์การฉีดยาในเวลานั้นพิสูจน์แล้วว่ามีประโยชน์ในการใช้ยาโดยตรงในกระแสเลือดสำหรับผู้ป่วยที่ไม่สามารถทนต่อยาในช่องปากได้ แม้ว่าอุปกรณ์ที่ใช้ในการฉีดยาจะไม่ผ่านการฆ่าเชื้อ แต่ยาก็ไม่ปลอดภัยเสมอไป
บางครั้งผู้ป่วยจะมีไข้สูงหนาวสั่นและปวดเมื่อยตามร่างกายและบางคนมีอาการช็อก แพทย์ไม่ทราบสาเหตุที่เกิดขึ้นบ่อยครั้งที่เรียกว่าไข้การฉีดตามเงื่อนไขไข้น้ำเกลือหรือไข้น้ำกลั่น ต่อมานักวิจัยค้นพบยาและวัคซีนบางชนิดที่ปนเปื้อนในห้องทดลองด้วย pyrogen endotoxins แบคทีเรียที่มีศักยภาพซึ่งทนต่อการฆ่าเชื้อ
ร่างกายมนุษย์ต่อสู้กับสารพิษจากแบคทีเรียในสิ่งแวดล้อมผ่านทางผิวหนัง เมื่อฉีดยาเสพติดที่ปนเปื้อนเข้าสู่กระแสเลือดสารพิษจะผ่านกลไกการป้องกันตามปกติ เซลล์เม็ดเลือดขาวเริ่มปล่อย pyrogen อีกรูปแบบหนึ่งที่ทำให้เกิดไข้สูงซึ่งอาจนำไปสู่การช็อกและเสียชีวิต
การทดสอบ Pyrogen ในห้องปฏิบัติการยาเกี่ยวข้องกับอุปกรณ์ให้ความร้อนที่ใช้ในการฆ่าเชื้อ ยาจะถูกฉีดเข้าไปในหลอดเลือดดำหูของกระต่ายเพื่อดูว่ามีไข้หรือไม่ อุณหภูมิทางทวารหนักของสัตว์ทดสอบจะถูกวิเคราะห์หลังจาก 30 นาทีและอีกครั้งหนึ่งถึงสามชั่วโมงต่อมา หากสัตว์ยังคงปราศจากไข้วิธีการแก้ปัญหานี้ก็จะปลอดจากสารพิษ
กระบวนการของการทดสอบ pyrogen ในสัตว์มักจะเกี่ยวข้องกับการฉีดกระต่ายหลายครั้งในเวลาภายในกรอบเวลา 10 นาที ขนาดของกระต่ายแต่ละตัวขึ้นอยู่กับน้ำหนักตัวอายุและเพศ กระต่ายกลุ่มเดียวกันอาจถูกทดสอบซ้ำ ๆ ทุกสองสามวันจนกว่าพวกเขาจะพัฒนาความอดทนต่อยาเสพติด
เทคนิคการทดสอบ pyrogen รุ่นใหม่เรียกว่าการทดสอบ limulus amoebocyte lysate (LAL) เลือดจากปูเกือกม้ามีสารพิษในระดับสูงที่พบในสิ่งมีชีวิตในทะเล นักวิทยาศาสตร์ค้นพบวิธีการใช้เลือดเพื่อทดสอบสารพิษจากแบคทีเรียในยาและวัตถุดิบที่ใช้ในการผลิตยา ขั้นตอนการทดสอบ pyrogen LAL อาจมีความไวมากกว่าวิธีทดสอบกระต่าย 100 เท่า อุปกรณ์การแพทย์ที่ถูกฝังเข้าไปในมนุษย์จะต้องผ่านการทดสอบ LAL พร้อมกับยากัมมันตรังสีและการระงับความรู้สึก
