ห้องสมุดยีนคืออะไร?

คลังยีนเป็นคำศัพท์สำหรับการรวบรวมชิ้นส่วนของกรด deoxyribonucleic (DNA) ที่ถูกโคลนแบบสุ่มจากจีโนมของสิ่งมีชีวิต พวกเขาถูกโคลนเป็นพลาสมิดซึ่งสามารถทำซ้ำแยกจากโครโมโซมและ phages ซึ่งเป็นไวรัสปรสิตที่กินแบคทีเรีย เมื่อโคลนเป็นพลาสมิดสะสมของเซลล์โฮสต์และแต่ละเซลล์มีชิ้นส่วนดีเอ็นเอ ห้องสมุดยีน Phage ประกอบด้วยสิ่งที่เรียกว่า phage lysates ซึ่งเป็นเซลล์ที่ถูกทำลายโดยมีส่วนดีเอ็นเอแทรกอยู่ เมื่อห้องสมุดยีนมีการรวบรวมข้อมูลทางพันธุกรรมทั้งหมดในสิ่งมีชีวิตพวกมันถูกพิจารณาว่าเป็นห้องสมุดยีนแบบเป็นตัวแทน

นอกจากนี้ไลบรารียังสามารถใช้เซลลูลาร์รีคอมบิแนนท์นิวคลีอิกแอซิด (RNA) สำหรับวัสดุ berthing และการสะสมของเซลล์โฮสต์ด้วยเวกเตอร์ recombinant นี้เป็นที่รู้จักกันในชื่อห้องสมุดยีน cRNA การคัดกรองห้องสมุดยีนพบว่าเซลล์ที่มีการโคลนเวกเตอร์ด้วยยีนที่ต้องการในไลบรารีของยีนและจากนั้นใช้หนึ่งในเทคนิคการแยกและเก็บเกี่ยวพวกมัน เมื่อทำการเก็บเกี่ยวเซลล์จะถูกพิจารณาว่าเป็นโคลน เพื่อให้มีโอกาสที่เหมาะสมในการแยกและคัดลอกยีนเฉพาะมักจะใช้ไลบรารียีนเชิงดำเนินการเป็นยีนทุกยีนและทุกส่วนดีเอ็นเอดั้งเดิมของจีโนมเฉพาะนั้นจะถูกเก็บรวบรวมไว้ในนั้น เพื่อให้ได้โอกาส 99% ในการค้นหายีนของมนุษย์โดยเฉพาะสำหรับการโคลนนิ่งเซลล์โคลนมากกว่า 600,000 เซลล์จะต้องได้รับการคัดเลือกเพื่อค้นหายีนที่ต้องการจากห้องสมุดยีนที่เป็นตัวแทน

DNA ถูกดึงออกมาจากสิ่งมีชีวิตเพื่อเริ่มต้นไลบรารียีน ห้องสมุดมีโครงสร้างเพื่อจัดระเบียบ DNA และยีนต่าง ๆ นับพัน ห้องสมุดกลายเป็นคอลเลกชั่นของแบคทีเรียนับหมื่นนับพันแต่ละตัวถูกดัดแปลงด้วยชิ้นส่วนดีเอ็นเอจากสิ่งมีชีวิตที่มียีนที่น่าสนใจเป็นพิเศษ ห้องสมุดยังมีเอนไซม์ จำกัด และพลาสมิด เอ็นไซม์ จำกัด ถูกใช้เพื่ออ่านข้อมูลนิวคลีโอไทด์ของ DNA และใช้เพื่อตัดดีเอ็นเอเป็นชิ้นส่วนโดยแยกนิวคลีโอไทด์ออกจากกัน

เอนไซม์ที่มีข้อ จำกัด เดียวกันนี้จะตัดพลาสมิดของแบคทีเรียและชิ้นส่วนและพลาสมิดรวมอยู่ในหลอดทดลองเพื่อรวมเข้าด้วยกันทำให้เกิดการรวมกันใหม่ พลาสมิดของ recombinant เหล่านี้จะถูกส่งกลับไปยังเชื้อแบคทีเรียโดยใช้ความร้อนหรือการดูดซับด้วยไฟฟ้า ขั้นตอนเหล่านี้จะถูกดำเนินการซ้ำไปซ้ำมาจนกว่าห้องสมุดยีนทั้งหมดจะถูกสร้างขึ้นสำหรับสิ่งมีชีวิตจีโนมเฉพาะจากชิ้นส่วนทั้งหมดของการสกัดดีเอ็นเอเดิม