Hybridoma คืออะไร

เซลล์ลูกผสมเป็นลูกผสมของเซลล์อีกสองชนิดที่เรียกว่าเซลล์เม็ดเลือดขาว B และเซลล์ myeloma เมื่อเซลล์เม็ดเลือดขาว B และเซลล์ myeloma ถูกไฮบริดพวกมันจะสร้างเซลล์ไฮบริมาซึ่งสามารถผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีได้ เมื่อแอนติบอดีเป็นโมโนโคลนอลหมายความว่าแอนติบอดีทั้งหมดในตัวอย่างที่ให้มานั้นมาจากลิมโฟซัยต์ B ชนิดเดียวกันและเหมือนกันทั้งหมด โมโนโคลนอลแอนติบอดีมีการใช้อย่างกว้างขวางรวมถึงในการวินิจฉัยโรคและการวิจัยทางชีววิทยา

ลิมโฟซัยต์บีเป็นเซลล์ที่ผลิตแอนติบอดีในระบบภูมิคุ้มกัน เซลล์และแอนติบอดี้ที่พวกมันสร้างขึ้นนั้นมีความสำคัญต่อการป้องกันการติดเชื้อแบคทีเรียเช่นเดียวกับการติดเชื้อไวรัสบางชนิด ลิมโฟซัยต์บีผลิตแอนติบอดีจำเพาะ แต่มีอายุขัย จำกัด เซลล์ myeloma เป็น B lymphocyte ซึ่งกลายเป็นมะเร็งและดังนั้นจึงเป็นเซลล์มะเร็ง เซลล์ Myeloma ไม่สามารถผลิตแอนติบอดี แต่สามารถแบ่งต่อไปในการเพาะเลี้ยงเซลล์อย่างไม่มีกำหนด

กระบวนการในการพัฒนาเซลล์ไฮบริโอมานั้นถูกคิดค้นขึ้นในปี 1970 ในการเริ่มต้นกระบวนการนี้หนูจะได้รับการสร้างภูมิคุ้มกันด้วยโปรตีนแอนติเจน จากนั้นเมาส์จะติดการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อแอนติเจนซึ่งรวมถึงเซลล์เม็ดเลือดขาว B ที่สร้างแอนติบอดีซึ่งจำแนกแอนติเจน ถัดไปม้ามของหนูที่ได้รับวัคซีนจะถูกลบออกและเซลล์เม็ดเลือดขาว B จะถูกแยกออกจากเนื้อเยื่อของม้าม

เซลล์เม็ดเลือดขาวที่ผลิตแอนติบอดี B จะถูกเพาะเลี้ยงด้วยเซลล์ myeloma วัฒนธรรมของเซลล์นั้นได้รับการบำบัดด้วยสารเคมีที่ทำให้เยื่อหุ้มเซลล์สามารถซึมผ่านได้ซึ่งหมายถึงพวกมันถูกคั่นด้วยรูเล็ก ๆ สิ่งนี้ช่วยให้เซลล์ myeloma และเซลล์เม็ดเลือดขาว B สามารถหลอมรวมได้ง่ายขึ้น เมื่อเซลล์เม็ดเลือดขาว B ฟิวส์กับเซลล์ myeloma ผลที่ได้คือเซลล์ลูกผสม ขั้นตอนต่อไปคือการแยกเซลล์ที่ถูกหลอมใหม่เพื่อให้แต่ละเซลล์อยู่ในวัฒนธรรมที่แยกจากกัน สิ่งนี้จำเป็นเพื่อให้แน่ใจว่าแอนติบอดีที่ผลิตโดยเซลล์นั้นเป็นโมโนโคลนอลและไม่ได้ปนเปื้อนด้วยแอนติบอดีจากเซลล์ต่าง ๆ

ในที่สุดเซลล์ไฮบริมาถูกเลือกสำหรับการเพาะเลี้ยงขึ้นอยู่กับว่าพวกเขารู้จักแอนติเจนที่ใช้ในการทำให้รอดจากหนูในช่วงแรกของกระบวนการ สิ่งนี้มีความสำคัญเนื่องจากเซลล์เม็ดเลือดขาว B ไม่ได้ผลิตแอนติบอดีชนิดเดียวกันทั้งหมดแม้ว่าจะได้รับการสร้างภูมิคุ้มกันจากแอนติเจนเดียวกันก็ตาม แต่ละเซลล์เม็ดเลือดขาว B ผลิตแอนติบอดีที่รับรู้แอนติเจนที่มีองศาที่แตกต่างของความจำเพาะและความแข็งแรง; ดังนั้นขั้นตอนการคัดเลือกเพิ่มเติมจะถูกใช้เพื่อแยกเซลล์ที่ผลิตแอนติบอดีออกมาพร้อมกับการตอบสนองที่ต้องการ

ความสามารถในการใช้ลูกผสมเพื่อสร้างโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อโปรตีนแทบทุกชนิดทำให้เป็นเครื่องมือทางวิทยาศาสตร์ที่มีประโยชน์อย่างยิ่ง โมโนโคลนอลแอนติบอดีถูกใช้อย่างกว้างขวางในการวิจัยทางชีววิทยาเพื่อระบุและแยกโปรตีนของเซลล์ ในยาวินิจฉัยโมโนโคลนอลแอนติบอดีเป็นเครื่องมือวินิจฉัยที่มีประสิทธิภาพเพราะสามารถใช้ในการตรวจหาแบคทีเรียไวรัสหรือเนื้องอกแอนติเจนซึ่งมีอยู่ในปริมาณน้อยในตัวอย่างเลือดหรือเนื้อเยื่อ