ELISA Assay คืออะไร?

ELISA Assay เป็นกระบวนการทดสอบที่ตรวจจับสารต่างๆเพื่อระบุโรคภูมิแพ้และยาผิดกฎหมายในร่างกาย เป็นที่ทราบกันดีว่าใช้ตรวจจับไวรัสเอชไอวี (HIV) สารบางอย่างที่สามารถตรวจพบได้คือแอนติบอดีฮอร์โมนและโปรตีน หลักการหลักที่อยู่เบื้องหลังการทดสอบของ ELISA คือปฏิกิริยาทางเคมีระหว่างตัวอย่างของเหลวของผู้ป่วยและตัวอย่างห้องปฏิบัติการที่เฉพาะเจาะจงบ่งชี้ว่ามีสารบางอย่างที่เกี่ยวข้องกับโรคเฉพาะหรือเงื่อนไขทางการแพทย์ ELISA ในฐานะตัวย่อย่อมาจาก“ การทดสอบเอนไซม์ที่เชื่อมโยงกับอิมมูโนซอร์เบนท์”

การประดิษฐ์และการพัฒนาของการทดสอบ ELISA เกิดขึ้นเพราะมีความจำเป็นสำหรับวิธีการทดสอบที่ปลอดภัยกว่าวิธีอื่นที่ไม่ใช่ radioimmunoassay ซึ่งใช้กัมมันตภาพรังสีในการสร้างปฏิกิริยาทางเคมี ในปี 1960 นักวิทยาศาสตร์สองกลุ่มที่แยกจากกันได้เป็นผู้นำโดย Stratis Avrameas และ GB Pierce ก็ประสบความสำเร็จในการสร้างแอนติบอดี้บางชนิดด้วยเอนไซม์และสร้างปฏิกิริยาทางเคมีจากการรวมกัน ด้วยความรู้นี้อยู่ในมือนักวิทยาศาสตร์สองคนจากมหาวิทยาลัยสตอกโฮล์มปีเตอร์เพิร์ลแมนมันและอีวาอิงวอลคิดค้นวิธี ELISA เผยแพร่การทดลองและระบบที่อยู่เบื้องหลังการทดสอบในปี 1971 ตั้งแต่นั้นมา ELISA assay ได้ถูกนำไปใช้ทั่วโลก ยังคงมีอยู่เนื่องจากต้นทุนที่น้อยลง

การทดสอบ ELISA มีอยู่สองประเภทด้วยกันคือวิธีการทางตรงและทางอ้อมวิธีหลังเป็นการใช้งานทั่วไปมากกว่า ขั้นตอนแรกคือการสกัดตัวอย่างจากผู้ป่วยโดยปกติจะเป็นเลือดหรือปัสสาวะซึ่งทั้งสองอย่างนี้อาจผ่านกระบวนการแยกเพื่อแยกเซรั่มใสที่มีแอนติบอดี้ ชุด ELISA มักจะมีจานที่บรรจุขนาดเล็ก 96 ตู้ที่เรียกว่า "wells" ซึ่งจะถูกเคลือบด้วยแอนติเจนที่อาจมีปฏิกิริยาต่อแอนติบอดีปัจจุบัน แอนติเจนมักถูกพิจารณาว่าเป็นสิ่งแปลกปลอมที่ร่างกายโจมตีโดยสร้างแอนติบอดีจำเพาะดังนั้นหากผู้ป่วยได้รับแอนติเจนจากโรคบางชนิดเซรุ่มของเขาควรมีแอนติบอดีที่สอดคล้องกับแอนติเจนดังกล่าว

ซีรั่มของผู้ป่วยจะถูกเทลงในบ่อแล้วบ่มเพื่อให้แอนติบอดีเกาะติดกับการเคลือบโปรตีน หลังจากระยะฟักตัวหลุมจะถูกล้างออกเพื่อลบส่วนที่เหลือของซีรั่มและแอนติบอดีอื่น ๆ ที่ไม่ได้ผูกไว้กับสารเคลือบผิว แอนติบอดีที่สกัดจากสัตว์อีกชุดหนึ่งโดยปกติแล้วหนูจะถูกเทลงในบ่อเพื่อตรวจหาแอนติบอดีของมนุษย์และจะมีการฟักตัวอีกครั้งและแอนติบอดีของสัตว์จะถูกล้างออกอีกครั้ง สารตั้งต้นของเอนไซม์จะถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อให้สามารถมองเห็นปฏิกิริยาในสี โดยทั่วไปเฉดสีที่เข้มจะบ่งบอกถึงผลลัพธ์ในเชิงบวกซึ่งหมายความว่าผู้ป่วยจะได้รับการทดสอบโรคหรือเงื่อนไขทางการแพทย์อื่น ๆ