ภายในเซลล์ที่มีชีวิตทั้งหมดการถอดรหัสเป็นกระบวนการที่สร้างเส้นของ RNA ซึ่งถูกเข้ารหัสตาม DNA ที่พบภายในเซลล์ RNA นั้นถูกใช้เพื่อสร้างโปรตีนภายในโปรโตปลาสซึมของเซลล์ ภายในสิ่งมีชีวิตต่าง ๆ กระบวนการของการถอดความอาจแตกต่างกันเล็กน้อย นี่เป็นเรื่องจริงโดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อดูยูคาริโอตและโปรคาริโอต คำถอดความยูคาริโอตอธิบายกระบวนการภายในยูคาริโอต
ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างสิ่งมีชีวิตยูคาริโอตและสิ่งมีชีวิตแบบโปรคาริโอตคือการมีอยู่ของเยื่อหุ้มเซลล์ที่มีเยื่อหุ้มเซลล์อยู่ภายในเซลล์ ยูคาริโอตมีเยื่อหุ้มเซลล์ที่ถูกผูกไว้เช่นนิวเคลียสและไมโตคอนเดรียในขณะที่โปรคาริโอตไม่มี นี่เป็นหนึ่งในความแตกต่างแรกและชัดเจนที่สุดระหว่างการถอดความโปรคาริโอตและยูคาริโอตเนื่องจากมันเป็นตัวกำหนดว่ากระบวนการเกิดขึ้นที่ใด การถอดความยูคาริโอตเกิดขึ้นภายในนิวเคลียสและไมโทคอนเดรียซึ่งเป็นที่ที่ DNA ถูกพบในเซลล์ประเภทนี้ เป็นผลให้การแปลต้องเกิดขึ้นหลังจากการถอดความในยูคาริโอตเนื่องจาก RNA จะต้องถูกส่งไปยังไซโตพลาสซึมจากภายในนิวเคลียส
ดีเอ็นเอยูคาริโอตเกือบทั้งหมดพบได้ในนิวเคลียสดังนั้นนี่จึงเป็นตำแหน่งหลักสำหรับการถอดความส่วนใหญ่ เมื่อ DNA กำลังถูกถอดความบริเวณใดพื้นที่หนึ่งของ DNA นั้นจะไม่ถูกเปิดออกเพื่อให้มันติดค้างเพียงเส้นเดียว ภูมิภาคนี้เรียกว่าซิสตรอนและในที่สุดก็เป็นรหัสสำหรับโปรตีนหลังจากการถอดความและการแปล ในกรณีส่วนใหญ่มีเอนไซม์สามตัวที่เกี่ยวข้องกับการถอดความยูคาริโอตกับหนึ่งสำหรับการถอดรหัสโปรคาริโอต
เอ็นไซม์ที่เกี่ยวข้องในการถอดรหัสเรียกว่า RNA polymerase และทั้งสามนั้นคือ RNA Polymerase I (RNA Pol I), RNA Polymerase II (RNA Pol II) และ RNA Polymerase III (RNA Pol III) ชนิดของ RNA กำหนดว่าจะใช้โพลิเมอร์สามชนิดใดในระหว่างการถอดรหัส RNA Pol I คัดลอก ribosomal RNA (rRNA) ซึ่งใช้ในการสร้างไรโบโซมภายในไซโตพลาสซึมและเป็นที่ที่การแปลเกิดขึ้น Messenger RNA เส้นที่ให้รหัสสำหรับโปรตีนถูกถอดความโดย RNA Pol II เอ็นไซม์ที่สาม RNA Pol III คัดลอก DNA ไปยังการถ่ายโอนอาร์เอ็นเอ (tRNA) ซึ่งใช้ในการส่งกรดอะมิโนที่เหมาะสมไปยังไรโบโซมเพื่อสร้างโปรตีน
ในระหว่างการถอดความยูคาริโอตหนึ่งใน RNA โพลิเมอร์จะเคลื่อนที่ไปตามสายเดี่ยวของ DNA เมื่อมันทำเช่นนั้นมันจะสร้างสายของ RNA โดยการเพิ่ม RNA นิวคลีโอไทด์ซึ่งเป็นส่วนประกอบที่พบในสายดีเอ็นเอ นิวคลีโอไทด์ RNA เป็นอิสระที่ลอยอยู่ภายในนิวเคลียสและพวกมันถูกดึงดูดไปยังดีเอ็นเอที่ไม่ถูกผูกของเส้นเดี่ยว เมื่อซิสตรอนถูกถอดออกแล้วสายใหม่ของ RNA จะต้องเดินทางผ่านรูขุมขนในเยื่อหุ้มเซลล์นิวเคลียร์เพื่อให้การแปลสามารถเกิดขึ้นได้ในไซโตพลาสซึม


