Western Blot คืออะไร

Western blot เป็นเทคนิคการวิเคราะห์ทางห้องปฏิบัติการที่ใช้ในการแยกโปรตีน มันสามารถใช้ในการวินิจฉัยโรคบางชนิดและในการวิจัยเกี่ยวกับโปรตีนและกระบวนการต่าง ๆ ชื่อเสียง blot ตะวันตกเชื่อมโยงกับการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวี แต่ก็สามารถใช้เพื่อค้นหาร่องรอยของโรคไข้สมองอักเสบจากวัว spongiform (BSE) และโรค Lyme ตัวอย่างที่ส่งออกไปทดสอบด้วยโปรโตคอล blot ตะวันตกสามารถส่งคืนผลลัพธ์ในสองสามวันถึงหลายสัปดาห์ขึ้นอยู่กับความสามารถของห้องปฏิบัติการและความเร่งด่วน

ในรอยเปื้อนตะวันตกตัวอย่างซึ่งอาจมาจากเลือดหรือเนื้อเยื่อจะถูกใส่เข้าไปในอิเล็กโตรโฟรีซิสก่อนเพื่อที่โปรตีนจะแยกออกตามความยาว แถบของเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสที่มีโปรตีนที่แยกได้ของความยาวเป้าหมายสามารถใช้ในการถ่ายโอนโปรตีนไปยังสารตั้งต้นไนโตรเซลลูโลสสำหรับขั้นตอนต่อไปของการทดสอบ ในระหว่างขั้นตอนนี้แอนติบอดีจะถูกนำไปใช้กับกลุ่มตัวอย่างโดยมีเป้าหมายในการติดแท็กโปรตีนด้วยแอนติเจนซึ่งแอนติบอดีนั้นจะล็อคอยู่

เมื่อมีการติดแท็กโปรตีนพวกมันสามารถระบุได้ง่าย ในกรณีของการทดสอบโรคการปรากฏตัวของโปรตีนปฏิกิริยาแสดงให้เห็นว่ากลุ่มตัวอย่างมีการทดสอบในเชิงบวก Western blots กลับมาเป็นผลบวกที่ผิดพลาดถึงแม้ว่ามันจะเกิดขึ้นได้ในบางโอกาสและพวกเขาอาจกลับมาเป็น false false ซึ่งบุคคลนั้นมีโรค แต่จริง ๆ แล้วมันไม่ได้แสดงให้เห็นถึงการทดสอบ blot ตะวันตก สิ่งนี้สามารถพบได้บ่อยในกรณีที่ตัวก่อให้เกิดโรคยังไม่เริ่มทำซ้ำ

นักวิจัยสามารถใช้ผลลัพธ์เพื่อระบุโปรตีนเฉพาะที่พวกเขากำลังติดตามและสำหรับวัตถุประสงค์อื่น ๆ ที่หลากหลาย ทำความเข้าใจว่าการทำงานของโปรโตคอล blot ตะวันตกเป็นทักษะที่สำคัญสำหรับนักวิจัยและช่างเทคนิคในห้องปฏิบัติการอย่างไรเนื่องจากพวกเขาจะต้องสามารถส่งคืนผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้และเชื่อถือได้โดยใช้วิธีนี้ ทักษะในห้องปฏิบัติการรวมถึงการเรียนรู้วิธีจัดการกับตัวอย่างที่ซับซ้อนหรือไม่ดีและวิธีการหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนในระหว่างกระบวนการเพื่อให้ทราบว่าผลการทดสอบเป็นจริง

เทคนิคนี้บางครั้งเรียกว่าอิมโมบิลล็อตเพราะโปรตีนที่ต้องการนั้นจะ“ ถูกลบล้าง” ด้วยแอนติบอดีเพื่อที่จะปรากฏขึ้น การทดสอบนี้สามารถใช้เพื่อค้นหาโปรตีนในสัตว์ทุกชนิดไม่ใช่แค่มนุษย์กับสัตวแพทย์มักใช้การทดสอบ blot ตะวันตกเพื่อตรวจสอบว่าฝูงวัวติดเชื้อหรือสัมผัสกับ BSE หรือไม่