Bakteriyel endotoksin testi tipik olarak, olası bir kirletici ile bir çözelti içinde karıştırıldığında, bir endotoksinin varlığını gösteren bir reaksiyona neden olan reaktiflerin kullanımını içerir. Kromojenik testler, jel pıhtılaşma testi ve türbidimetrik testler, bilim adamlarının bakteriyel endotoksin testleri için yaygın olarak kullandıkları yöntemlerdir. Teknisyenler endotoksin kontaminasyonunu kontrol ederken bu değerlendirme yöntemlerini çeşitli maddeler ve nesneler üzerinde kullanırlar. Su, ilaç, ekipman ve ambalaj yapımında kullanılan hammaddelerin hepsi endotoksin standartlarını geçmelidir.
Bakteriler, mantarlar ve virüslerin hepsi, LPS olarak da adlandırılan, lipopolisakaritlerden oluşan koruyucu dış zarlara sahiptir. Bu zincirlerin lipit kısmı endotoksinler içerir. Bu maddeler genellikle zarın içinde kalır ancak hücre bölünmesi sürecinde ve hücresel yıkım veya parçalanma sırasında salınır. İnsanlarda, bu maddeler ateş, anormal pıhtılaşma, septik şok ve diğer semptomlara neden olur, ancak hücre içindeki ekotoksinlerin aksine, endotoksinler bir toksoza dönüşmez. Genel olarak, mikrobiyologlar, E. coli de dahil olmak üzere çeşitli gram-negatif bakterilerle ilişkili endotoksinlerin varlığını kontrol eder.
Jel pıhtılaşma testi veya Limulus amitosit lizat (LAL) deneyi, ayrıca Limulus polyphemus olarak da adlandırılan, at nalı yengeçinin amipositlerinden türetilen bir zar tahrip edici kimyasalın kullanılmasını içerir . Teknisyenler, lizat söz konusu nesneye veya maddeye maruz kaldığında pıhtılaşma veya jelleşme meydana gelirse, endotoksinlerin pozitif bir işaretini gözlemler. Mikrobiyologlar tipik olarak kesin sonuçlar için kromojenik ve türbidimetrik testlerle birlikte bu bakteriyel endotoksin testi yöntemini kullanır.
Kromojenik bakteriyel endotoksin testi, özel işlem görmüş bir LAL kullanır. Bu lizat bir endotoksin ile temas ettiğinde, reaksiyon belirli bir renk üretir. Son test işlemi, çözeltinin bulanıklığını veya bulanıklığını ölçmeyi içerir. Teknisyenler, jel pıhtısı testinde oluşturulan çözeltiyi bir ışık demeti yayan bir spektrofotometreye maruz bırakmaktadır. Mikrobiyologlar, solüsyondan geçerken ışındaki ışık yoğunluğu kaybını ölçerek, bir endotoksinin olup olmadığını belirleyebilirler.
Laboratuar ortakları genellikle bu üç bakteriyel endotoksin testini doğru sonuçları elde etmek için iki veya üç kez tamamlar. Jel testi sadece en düşük saptama limiti mililitre başına 0,03 Ehrlich Ünitesi (AB / ml) olduğu için kullanılmaz. Kromojenik ve türbidimetrik testler, 0.005 EU / ml aralığında endotoksinleri tespit eder. Güvenlik parametreleri, test edilen maddeye bağlı olarak büyük ölçüde farklılık gösterir. Enjeksiyon veya sulama amaçlı kullanılan steril su, 0.25 EU / ml'den daha fazlasını içeremezken, inhalasyon amaçlı steril su, 0.5 EU / ml'ye kadar içerebilir.
