ELISA prosedürü klinikte başlar ve hastadan bir kan örneği alınır. Daha sonra laboratuardaki ELISA test kiti kullanılarak birkaç adım izlenir. Test, kanda HIV gibi bir hastalığa karşı antikor veya antijenlerin varlığını tespit edecektir. Adımlar, çeşitli maddelerin eklenmesini ve yıkanmasını içerir ve sonuçlar genellikle bir renk değişikliği ile ölçülür.
Enzim bağışıklık tahlili (EIA) olarak da ifade edilen enzim bağlı immünosorbent tahlili (ELISA), bir teşhis testi olarak kullanılır. En iyi HIV için bir tanı testi olarak bilinir. Test plakası genellikle içine belirli bir antijenin hareketsiz hale getirildiği 96 küçük oyuktan oluşur. Antikor serum numunesinde mevcutsa, antijene bağlanır ve ELISA prosedürünün çeşitli aşamaları yoluyla tespit edilmesine olanak sağlar.
ELISA prosedüründeki ilk adım hastadan bir örnek elde etmektir. Bu, steril koşullar altında bir hemşire tarafından yapılır. Kan genellikle kol veya eldeki bir damardan alınır. Damarı şişirmek ve işlemi kolaylaştırmak için kol üzerine bir turnike yerleştirilir ve iğnenin yerleştirileceği yer deri temizlenir. İğne girerken ve kan steril bir tüpte toplandığında küçük bir hıyar hissedilebilir.
Kan örneği alındıktan sonra, ELISA prosedürünün geri kalanının laboratuar teknisyeni tarafından gerçekleştirileceği laboratuara transfer edilir. Kan örneği ilk önce ELISA plakasının oyuklarına eklenir. Spesifik antikor mevcutsa, antijene bağlanır. Plaka, bağlanmamış antikorları çıkarmak için bir tampon kullanılarak yıkanır.
Normalde kendisine bağlı bir enzime sahip olan hayvan kökenli ikinci bir antikor daha sonra antikor-antijen kompleksine bağlanacak şekilde eklenir. Plaka, fazlalığı gidermek için tekrar yıkanır. Enzim, ELISA prosedürünün sonuna bir substrat ilave edildiğinde renk reaktifdir. Sonucu veren renk değişim derecesinin ölçümüdür.
Yanlış sonuçlardan kaçınmak için ELISA prosedürünün dikkatli bir şekilde takip edilmesi gerekir. Çoğu ELISA plakasında, bu tür yanlış sonuçları en aza indirmek için pozitif ve negatif kontrol dahil edilir. HIV testi yapılırken, olumlu bir sonuç genellikle Western Blot gibi farklı bir türde ikinci, onaylayıcı, testle takip edilir.
