Bir kişinin ilk ne düşündüğünün aksine, bir biyotin antikoru, biyotine karşı yetiştirilen bir madde değildir. Aksine, bir biyotin antikoru, biyotine konjuge edilmiş bir antikordur. Biotin, floroforlar gibi ışığı algılayan moleküllere konjuge olabilen bir ligand - avidine - kuvvetle bağlanır. Biyotin ve avidin, bilinen bilimsel biyolojik araştırmalarda özellikle faydalı olan biyotin ve avidin konjuge ligand / reseptör ünitelerini oluşturan, biyolojik olarak en uygun kovalent bağlardan birini oluşturur.
Biotin bir B kompleks vitamindir - B7 vitamini. O kadar küçük bir moleküldür ki, çoklu biyotin molekülleri tek bir monoklonal veya poliklonal antikora birleştirilebilir. Biotin'in suda çözünür olması gerçeği, tampon sistemlerinde çözünmezden daha fazla çok yönlülük sağlar. Daha fazla spesifiklik için, biyotine monoklonal antikor konjugasyonu genellikle poliklonal antikor konjugasyonu üzerinde önerilir. Biyotin molekülü, ilgilenilen antikorla doğrudan bağlanabilir veya daha fazla hareket serbestliği sağlamak için moleküler bir kuyruktan bağlanabilir.
Biotin ligand avidini yumurta albümininde bulunur. Ucuz bir şekilde yapılabilir ve kolayca izole edilebilir. Birden fazla avidin molekülü, her bir biotin reseptörüne bağlanarak tek bir antikor tespit sinyalini güçlendirir. Bir biotin antikoru ilgilenilen bir antijene yapışırsa, bir deneyci kompleksi floroforlara konjuge edilmiş avidine maruz bırakarak kompleksi tespit edilebilir hale getirir. Floresan görüntüleme sayesinde, biyotin antikoru ve avidin konjuge ligand ışık mikroskobu ile tespit edilebilir ve ilgilenilen antijenler in situ çalışılabilir.
Bir biotin antikorunun ve flüoresan olarak etiketlenmiş bir avidin molekülünün oluşturulması ve kullanılması, antijen tespiti için ortak bir çözüm olmasına rağmen, yine de biotin / avidin kompleksinden faydalanan alternatifler mevcuttur. Biotin'in bir nörotoksin gibi bir ligand'a bağlanması, söz konusu nörotoksinden etkilenen nöronal reseptörlerin yerleştirilmesinin tespitinde avantajlı olabilir. Ayrıca, bu nükleotid dizilerinin proteinlere dönüştürüldüğü yeri bulmak veya hücresel mRNA düzenlemesini tespit etmek için biyotini haberci ribonükleik asit (mRNA) gibi bir nükleotid dizisine konjuge etmek de mümkündür.
Biyotinile edilmiş poliklonal veya monoklonal antikorlar satın almak mümkündür, bununla birlikte, biyotinile edilmiş antikor üretimi birçok deneycinin yeteneği dahilindedir. Protokoller, antikor biyotinilasyon yöntemlerini öneren çevrimiçi olarak bulunabilir, ancak en kolay takip edilen protokoller, biyotini moleküler bir ara parçanın nasıl birleştirileceğini göstermek yerine doğrudan bir antikora bağlar. Biotin ve ilişkili antikor arasındaki moleküler aralayıcılar, daha fazla molekülün bağlanma alanlarına maruz kalmasına daha fazla boşluk bırakılmasına izin verir ve bu biotin antikorları, genellikle yapılmak yerine satın alınır.
