Serum ELISA Nedir?

Serum enzim bağlı immünosorbent deneyi (serum ELISA), bir antijen ve bir antikor arasındaki spesifik etkileşime dayanarak bir serum numunesindeki biyolojik bir maddenin miktarını belirlemek için kullanılan bir yöntemdir. İlgilendiği biyolojik maddelerin örnekleri arasında insan immün yetmezlik virüsüne (HIV) karşı bir antikor gibi viral bir enfeksiyona yanıt olarak üretilen bir antikor veya insan koryonik gonadotropin (hCG) gibi hamileliği belirten bir hormon veya bir otoimmün; romatoid faktörde olduğu gibi romatoid artritte üretilen antikor. Genel olarak, bir serum numunesindeki antijenin varlığını tespit etmek için spesifik bir antikor kullanan doğrudan bir tahlil ve bir serum numunesinde antikorların varlığını belirlemek için bir antijen kullanan bir dolaylı tahlil vardır.

Doğrudan serum ELISA'da, bilinmeyen miktarda antijen içeren bir numune, bir reaksiyon tüpü veya bir mikrotiter plaka gibi hareketsiz bir yüzeye tutturulur ve bir enzime kimyasal olarak bağlanmış olan belirli bir antikorla inkübe edilir. Tersine, dolaylı serum ELISA'da, bilinen bir antijen hareketsiz bir yüzeye eklenir ve daha sonra bilinmeyen miktarda antikor içeren serum numunesiyle inkübe edilir. Serum numunesindeki antijene özgü antikorun, immobilize edilmiş antijene sıkıca bağlanması beklenirken, spesifik olmayan antikorlar, aşağıdaki yıkama adımlarında çıkarılır. Genellikle, hareketsiz yüzey tüm antikorların düzensiz bölgesini tanıyan ve bir enzime kimyasal olarak bağlanmış olan ikinci bir antikorla muamele edilir. Hem doğrudan hem de dolaylı ELISA'da, son adım, serum numunesinde bulunan antijen veya antikor miktarıyla doğrudan orantılı olan ölçülebilir bir sinyal üreten bir reaksiyonu başlatan bir enzime spesifik substratın eklenmesinden oluşur.

Serum ELISA, çeşitli nedenlerden dolayı yaygın olarak kullanılan bir testtir. En önemlisi, antijen-antikor etkileşiminin özgüllüğü nedeniyle güvenilir bir klinik test olarak kabul edilir ve bu tahlilin hassasiyeti, biyolojik maddelerin serumdaki son derece düşük konsantrasyonlarda tespitine izin verir. Aynı anda çok sayıda örneğin değerlendirilmesi için tasarlanmıştır ve bu nedenle HIV antikorlarının varlığı için kan bağışı örneklerinin taranması gibi büyük ölçekli işlemlerde kullanılır. Ek olarak, genel olarak tahlil edilmiş antikorları ve antijenleri ölçen ELISA kitleri, klinik veya araştırma ortamlarında kullanım için ticari olarak temin edilebilir ve tam bir deneyi gerçekleştirmek için gerekli tüm reaktifleri uygun şekilde içerir.

Büyüyen bir çalışma alanı, sitokin tespiti alanında serum ELISA teknolojisinin uygulanmasını içerir. Sitokinler, genellikle enflamatuar süreçlerde yer alan bağışıklık sistemi tarafından salgılanan çözünebilir protein molekülleridir; Bu nedenle sitokin seviyeleri, kalp hastalığı, otoimmün hastalıklar ve sindirim hastalıkları gibi kronik iltihaplanma ile ilişkili hastalık durumları hakkında bilgilendiricidir. Sitokin seviyelerinin değerlendirilmesinin, Crohn hastalığı ve ülseratif kolit gibi enflamatuar barsak hastalıklarını ayırt edebileceği ve sonunda kalp hastalığı ve romatoid artritte sonucu tahmin edebileceği düşünülmektedir.