Konfokal Mikroskop Nedir?

Konfokal bir mikroskop, yüksek kaliteli 2D ve 3D görüntüler elde etmek için kullanılan belirli bir floresan mikroskobudur. Bazik (geniş alanlı) bir flüoresan mikroskobu ile, belirli bir dalga boyunda ışık, bir numunenin üzerinde parlatılır ve örnek, bu ışığın bir kısmını emer ve kalanını daha uzun bir dalga boyunda yansıtır. Uzun dalga boylu ışık, daha uzun dalga boylu ışığa izin veren, ancak orijinal (daha kısa) dalga boylu ışığın geçmesine izin veren dikroik bir aynadan geçer. Örneği görüntüleyen kişi yalnızca dikroik aynadan geçen ışığı görür. Temel floresan mikroskoplar, hem yüksek hem de yüksek çözünürlük gerektirmeyen büyük örnekler için iyi çalışan hem odak hem de odak dışı ışığı yakalar. İnce ayrıntıları görüntülemek için çok iyi çalışmıyor. Yüksek çözünürlüklü floresan görüntüleri yakalamak için bir konfokal mikroskop gereklidir.

Konfokal mikroskop, odak ışığını reddetmek için bir iğne deliği kullanır. Işık sadece dikroik bir aynadan geçen ışık yerine, hem dikroik bir aynadan hem de bir iğne deliğinden geçer, bu da numuneyi görüntüleyen kişinin numunenin sadece bir noktasını görmesi anlamına gelir. Numunenin tamamını görüntülemek için hareketli aynalar, numunenin dikdörtgen düzleminde ışığı tarar ve numune taranırken bir bilgisayar yayılan ışığı toplar. Tam bir tarama, numunenin optik bir dilimine veya kesitine neden olur. Bu tür mikroskopiye, kısmen ışık kaynağı olarak bir lazer kullanıldığı için konfokal lazer tarama mikroskopisi denir.

3B bir görüntü oluşturmak için, birkaç tarama yapılır, örneğin birkaç "dilimi" oluşturulur ve bir bilgisayar her dilimi birleştirerek üç boyutlu bir görüntü oluşturur. Mikroskop, kullanıcının elde etmek istediği 3D görüntünün ne kadar net olduğuna bağlı olarak dilimler arasındaki boşluğu değiştirecek şekilde programlanabilir. Mikroskop ayrıca, bir görüntüyü tarama hızını değiştirebilir; yavaş tarama, hızlı taramadan daha yüksek çözünürlük sağlar.

Konfokal mikroskop, birçok yaşam bilimi laboratuarında çok kullanılan bir ekipman parçası haline geldi. Pahalıdırlar ve biraz geniştirler ve sıklıkla kullanımlarına adanmış odalara sahiptirler, çünkü iyi bir floresan görüntü elde etmek için odanın karanlık olması gerekir. Her ne kadar konfokal mikroskoplar, hücrelerdeki hücreleri ve yapıları görüntülemek için en yaygın şekilde kullanılsa da, herhangi bir üç boyutlu floresan numunesinin bir görüntüsünü elde etmek için kullanılabilir ve bazen yarı iletken materyalleri görüntülemek için kullanılabilir.