Antikor Konjugatı Nedir?

Bir antikor konjugatı, bağlı antikorları lokalize etmek için histolojik veya enzimatik antijen tespit analizlerinde kullanılabilecek bir etiketleme molekülüdür. İlgili bir antijeni etiketlemek için kullanılan antikora fiziksel olarak bağlanarak veya konjuge edilerek işlev görür. Bir antikor konjugatına etiketlenmiş bir antikor, araştırmada sıklıkla antikorun veya antikorların yükseltildiği ilgili protein veya antijenlerin tam yerini veya miktarını tanımlamak için kullanılan bir araçtır.

Histolojik ve proteomik analizler, spesifik proteinlerin etiketlenebileceği araştırma tekniklerinde reaktif olarak antikorlara güvenir. İlgili bir antijeni veya proteini, kendisine karşı geliştirilen bir antikora maruz bırakarak, antijenler veya proteinler etiketlenebilir. Bir antikor konjugatı kullanarak - yani, özel olarak kullanılan veya kolayca saptanması için sentezlenen bir moleküle konjuge edilmiş bir antikor - kendi antijenleri üzerindeki antikorlar daha sonra tanımlanabilir ve tahlil edilebilir. En yaygın antikor konjugat tipi, bir floresan mikroskobu altında dokudaki antijenlerin tanımlanmasına izin veren bir floresan molekülüdür. Diğer konjugatlar, diaminobenzidin (DAB) ile daha sonra geliştirilmesi için antikorlarla konjugasyonda kullanılan at turpu peroksidazı gibi molekülleri içerir.

Çoğunlukla primer antikorlar spesifik antijenlere karşı yükseltilirken, sekonder antikorlar etiketleme moleküllerine konjuge edilir ve primer antikora karşı yükseltilir. Bir örnek olarak, Antijen X adı verilen bir antijenin tanımlanması ile ilgilenilebilir. Daha sonra, örneğin, bir fare içinde yükseltilmiş ve Antijen X'e yapışan ve yapışan bir fare içinde yükseltilmiş bir antikor kullanılır. Bu birincil fare antikorlarının nerede bulunduğunu bulmak için ve bu Antijen X moleküllerine bağlı olarak, ikincil bir antikor kullanılacaktır - örneğin, bir keçi içinde yükseltilmiş olan - bu ikincil antikoru enzimatik veya flüoresan mikroskobik deneylerde tespit edilebilir yapan bir konjugat ile etiketlenecektir. Bir elektron mikroskobu kullanılarak antijenlerin lokalize edilmesine yönelik deneyler için, altın partiküller sıklıkla bir antikor konjugatı olarak kullanılır, çünkü bir elektron ışını kullanılarak tespit edilebilirler.

Birincil ve ikincil antikorları kullanma nedeni, içinde birincil antikorun doğrudan konjuge olduğu bir antikor konjugasyonu kullanmak yerine maliyet etkinliğidir. Antikor konjugasyonu zaman ve reaktifler açısından pahalıdır. Özellikle nadir görülen antijenler için, birincil antikorlarda antikor konjugasyonu, üretim masrafına değmez. Aksine, sekonder antikorlarda antikor konjugasyonu kullanılarak, büyük miktarlarda konjuge antikor bir defada sentezlenebilir ve birçok farklı antijeni lokalize etmek için uyarlanmış bir dizi primer antikorla yapılan deneylerde kullanılabilir ve bu da üretim prosesini faydalı ve uygun maliyetli hale getirir.

Bununla birlikte, bazı durumlarda, çoklu antikorların kullanılmasından kaynaklanan yüksek oranda spesifik olmayan antikor bağlanması nedeniyle algılama sinyalindeki gürültüyü azaltmak için bir birincil antikor etiketlenecektir. Bu pahalı olsa da, oldukça hassas analizler hala bu metodu arayacaktır. Bir araştırmacının, konjugatları kendi seçtikleri antikorla etiketlemesine izin veren, reaktifin maliyetini artıran, ancak protokol adımlarını azaltan ve muhtemelen son antikor tespit deneyinde sinyal-gürültü oranını artıran kitler satın almak mümkündür.