Elektroforetik Hareketlilik Kaydırma Tahlili Nedir?

Bir tahlil, bir hücrenin orijinal parçalarını tanımlanması kolay parçalara ayırmak için tasarlanmış bir testtir. Elektroforetik mobilite kaydırma deneyi, makromoleküllerin proteinler gibi makromoleküllerin büyüklüğüne bağlı olarak farklı makromoleküller arasında ayrılmaya neden olmak üzere bir jel matrisinde hareket ettirilmesi için elektrik kullanan bir deneydir. Bir otomobil aküsü gibi, negatif ve pozitif uçlar elektroforetik mobilite kaydırma denemesinin veya jel kaydırma denemesinin zıt taraflarındadır. Bu, elektriğin yüke bağlı olarak makromolekülleri çekmesine neden olur. Her makro molekül farklı bir hızda hareket eder, çünkü küçük olanlar jelden daha az parazit alır.

Bir elektroforetik hareketlilik kaydırma deneyi oluşturmak için birkaç adım gereklidir. Ayrılması gereken makro moleküller önce hazırlanmalıdır. Makromoleküllerin çoğu canlı hücrelerden elde edilir ve özel prosedürler gerektirir. Ayrılacak olan parçaların elde edilmesi genellikle bir santrifüj ve hücreleri parçalayan kimyasal bir reaksiyon gerektirir. Santrifüj, yüksek hızda bir flakon döndürür ve gerekli olan makromoleküllerin bir peletini oluşturur. Bu çözülür ve çoğunlukla jel kaydırma deneyini takip etmek için bir renk veya başka bir etiket eklenir.

Bazen yatak olarak adlandırılan jel, sıvıdan jele hızlı bir şekilde dönüşen kesin bir toz agaroz ve su karışımından da taze bir şekilde yapılmalıdır. Genellikle bir elektroforetik hareketlilik kaydırma deneyi, farklı makromolekül karışımlarını karşılaştırmak için kullanılan ayrı deneyler için çeşitli şeritlere sahip olacaktır. Bir şerit daima kontrol olarak ayarlanmıştır ve genellikle sadece bir tür makromolekül içerir.

Güç kaynağı dikkatlice seçilmeli ve her şey hazır olana kadar bağlı olmamalıdır. Gücün açık olduğu süre, makromoleküllerin hareketlilik kaymasını belirler. Doğru analiz için parçaları ayırmak önemlidir. Güç uygun şekilde zamanlanmamışsa gelecekteki karşılaştırmalar da yanlış olacaktır. Makromoleküllerin yönü, doğal olarak sahip oldukları yüke göre belirlenir - çoğu negatif uca doğru hareket eder.

Basit genetik testler ve protein analizleri genellikle bir elektroforetik mobilite kaydırma testi ile yapılır. Bu, farklı şeritlerde farklı vardiyalarla gösterilir. Bir etkileşim meydana gelirse, makromoleküller, tek bir makromolekül ile kontrol şeridine kıyasla matris boyunca birleşip yavaşlar. Jel kaydırma deneyleri, karmaşık yöntemlerin tamamlanmasının daha uzun sürdüğü genetik sonuçları hızlı bir şekilde ortadan kaldırmak veya onaylamak için kullanılır. Ayrıca, bir bağışıklık sistemi makromolekülü olan antikorların, bakteri ve virüslerle savaşmak için kullanılabilecek proteinlere yapışıp yapışmadıklarını da belirleyebilirler.