ELISA Testi Nedir?

Bir ELISA Testi, belirli hastalıkları, alerjileri ve vücuttaki yasadışı ilaçları tanımlamak için maddeleri tespit eden bir test işlemidir. İnsan immün yetmezlik virüsünü (HIV) tespit etmek için kullanıldığı da bilinmektedir. Algılayabileceği maddelerin bazıları, antikorlar, hormonlar ve proteinlerdir. ELISA testinin arkasındaki ana prensip, bir hastanın sıvı numunesiyle spesifik bir laboratuar numunesi arasındaki kimyasal reaksiyonun, spesifik bir hastalık veya tıbbi durumla bağlantılı belirli bir maddenin varlığını göstermesidir. ELISA, bir kısaltma olarak “enzime bağlı immünosorbent deneyi” anlamına gelir.

ELISA testinin icadı ve geliştirilmesi, kimyasal bir reaksiyon üretmek için radyoaktiviteyi kullanan radioimmunoassay dışında daha güvenli bir test yöntemine ihtiyaç duyulduğundan ortaya çıktı. 1960'lı yıllarda Stratis Avrameas ve GB Pierce öncülüğünde iki ayrı bilim insanı grubu, bazı antikorları belirli enzimlerle eşleştirmede ve kombinasyondan kimyasal reaksiyon üretmede başarılı oldu. Eldeki bu bilgiyle, Stockholm Üniversitesi'nden iki bilim adamı Peter Perlmann ve Eva Engvall, 1971'de deneylerini ve testin arkasındaki sistemi yayınlayan ELISA yöntemini icat etti. Düşük maliyeti nedeniyle hala kullanılabilir.

İki yaygın ELISA testi türü vardır: doğrudan ve dolaylı yöntem, ikincisi daha yaygın olarak kullanılır. İlk adım hastadan bir örnek almaktır, genellikle her ikisi de antikorları içeren berrak serumu çıkarmak için bir ayırma işlemine tabi tutulabilecek olan genellikle kan veya idrar. Bir ELISA kiti genellikle, mevcut bir antikora reaksiyona girebilecek bir antijenle kaplanacak olan “kuyucuk” adı verilen 96 mini kap içeren bir plaka içerir. Bir antijen, sıklıkla, spesifik antikorlar üreterek vücudun saldığı yabancı bir madde olarak kabul edilir, bu nedenle eğer hasta belirli bir hastalıktan bir antijen edindiyse, serumu, söz konusu antijene karşılık gelen antikorları içermelidir.

Daha sonra hastanın serumu oyuklara dökülecek ve daha sonra antikorların protein kaplamaya yapışması için kuluçkalanacaktır. Kuluçka süresinden sonra, serumun geri kalan kısmını ve kaplamaya bağlanmayan diğer antikorları çıkarmak için oyuklar durulanır. İnsan antikorlarını tespit etmek için çukurlara hayvanlardan, genellikle sıçanlardan çıkarılan başka bir antikor seti dökülecek ve başka bir inkübasyon süresi gerçekleşecek ve hayvan antikorları tekrar yıkanacaktır. Bir enzim substratı daha sonra eklenecek, böylece reaksiyon gözle görülür şekilde renklerde görülebilir. Tipik olarak, güçlü bir renk tonu, pozitif bir sonuç gösterecektir; bu, hastanın hastalığa veya test edilen diğer tıbbi koşullara sahip olduğu anlamına gelir.