Kantitatif Floresans Nedir?

Kantitatif floresans, bir numunede yayılan radyasyonun sergilenmesidir. Bir bilim adamı görüntüleme teknolojisini kullanarak, örnek hakkında bilgi toplayabilir ve yapısı veya işlevi hakkında daha fazla bilgi edinmek için kullanabilir. Bu yaklaşım biyolojide tek tek hücreleri ve tüm organizmaları incelemek için yaygın olarak kullanılır. Mikroskopi ekipmanı ve uygun hassasiyette kameralar içeren bir laboratuara erişim gerektirir. Elde edilen verilerin tartışılmasıyla birlikte, bu analiz şeklindeki görüntülerin örnekleri ders kitaplarında ve bilimsel makalelerde görülebilir.

Mikroskop görüntüleme için hazırlanan örnekler, hücre içindeki spesifik yapılara bağlanan proteinler gibi floresan etiketlerle boyanabilir. Bu etiketler kamerayla doğru koşullarda görüntülendiğinde, bunlar yanar. Sadece aydınlatmayı gözlemlemek araştırmacı için önemli bilgiler sağlayabilir. Örneğin, belirli bir antikorun izlerini arayan bir immünolog, onu tanımlamak için bir etiket kullanabilir. Bu, aydınlatmanın numunenin nitelikleri hakkında genel bilgi sağladığı niteliksel floresan örneğidir.

Nicel floresans ölçümlerinde, araştırmacı spesifik, ölçülebilir bilgiler toplar. Bu, ışığın kesin yoğunluğu hakkında veri içerebilir. Numunenin ileri işlem görmesi, numunelerin içindeki yapıların hareketi hakkında bilgi sağlayan, Foto-Ağartma Sonrası Floresan Geri Kazanımı (FRAP) gibi ileri görüntüleme teknikleri için fırsatlar sunabilir. Tüm bu kantitatif floresan teknikleri, bir yapının ne olduğu, nasıl çalıştığı ve ne içerdiği hakkında yeni bir fikir verebilir.

Bu tür işler için hassas ekipman gereklidir. Bir numuneye eklenen herhangi bir flüoresan muamelesinin, istenen yapıları ve başka hiçbir şeyi etiketlememeleri için dikkatlice hazırlanması gerekir. Ekipmanın uygun şekilde hassas olması ve doğru bilgi topladığını doğrulamak için kalibre edilmesi gerekir. Bir dijital kameradaki dedektör kapalıysa, örneğin, numunenin bazı kısımlarında flüoresans toplamak başarısız olabilir veya yanlış bir okuma üretebilir. Her iki durumda da veriler yanlış olur.

Patoloji laboratuvarları bazı örneklerin değerlendirilmesi için kantitatif floresans kullanabilir. Bu teknik araştırmada da yaygın olarak kullanılmaktadır. Bazı çarpıcı görüntüler, sinirler veya spesifik proteinler gibi yapıları ayırmak için floresan etiketlerinin yardımı ile geliştirilebilir. Görsel olarak dikkat çekici olmasının yanı sıra, görüntüler okuma yeteneğine sahip araştırmacılar için çok sayıda bilgi içerebilir. Daha fazla veri çıkarmak ve anlamlı sonuçlar elde etmek için, sayısal bilgisayarlardaki flüoresans görüntülerini gelişmiş bilgisayar programları ile analiz etmek mümkündür.