Western Blot Nedir?

Western blot, proteinleri izole etmek için kullanılan bir laboratuvar analiz tekniğidir. Bazı hastalıkların teşhisinde ve ayrıca çeşitli protein ve işlemlerin araştırılmasında kullanılabilir. Ünlü olarak, western blot HIV enfeksiyonunun teşhisi ile bağlantılıdır, ancak sığır süngerimsi ensefalit (BSE) ve Lyme hastalığının izlerini aramak için de kullanılabilir. Western blot protokolü ile test için gönderilen numuneler laboratuvar kapasitesine ve aciliyetine bağlı olarak birkaç gün ila birkaç hafta içinde sonuç verebilir.

Western blotta, kan veya dokudan olabilen örnek ilk önce elektroforezden geçirilir, böylece proteinler uzunluk olarak ayrılır. Hedef uzunluktaki izole edilmiş proteinlere sahip bir elektroforez jel şeridi, testin bir sonraki aşaması için proteinleri bir nitroselüloz substratına aktarmak için kullanılabilir. Bu aşama sırasında, proteinleri, üzerine antikorların kilitlediği antijenlerle etiketlemek amacıyla numuneye bir antikor tanıtılır.

Proteinler etiketlendikten sonra kolayca tanımlanabilirler. Hastalığın test edilmesi durumunda, reaktif bir proteinin varlığı, numunenin pozitif olarak test edildiğini gösterir. Western blotlar nadiren yanlış pozitifler verir, ancak bu durum gerçekleşebilir ve aynı zamanda bir kişinin gerçekten bir hastalığı olduğu yanlış negatifler de verebilir, ancak western blot testinde gösterilmez. Bu, özellikle hastalığa neden olan ajanın henüz çoğalmaya başlamadığı durumlarda yaygın olabilir.

Araştırmacılar sonuçları, takip ettikleri belirli proteinleri tanımlamak için ve çeşitli başka amaçlar için kullanabilirler. Western blot protokolünün nasıl çalıştığını anlamak, bazı araştırmacılar ve laboratuvar teknisyenleri için bu yöntemi kullanarak güvenilir ve güvenilir sonuçlar elde edebilmeleri için önemli bir beceridir. Test sonuçlarının doğru olduğu bilinen karmaşık veya kötü örneklerin nasıl ele alınacağını ve işlem sırasında kontaminasyondan nasıl kaçınılacağını da içeren laboratuar becerileri.

Bu teknik bazen bir immünoblot olarak bilinir, çünkü temel olarak istenen proteinler ortaya çıkacak şekilde antikorlarla "lekelenir". Bu test, sadece insanlarda değil, tüm hayvanlarda, ineklerin sürüsünün enfekte olup olmadığını veya BSE'ye maruz kalmadığını belirlemek için sıklıkla western blot testini kullanan veteriner hekimler ile protein aramak için kullanılabilir.