Toplam RNA İzolasyonu Nedir?

Toplam ribonükleik asit (RNA) izolasyonu, hücresel RNA'nın tümünü bir doku numunesinden çıkarmak için kullanılan bir laboratuar tekniğidir. Bu, belirli RNA türlerini seçici olarak çeken diğer işlem yöntemlerinden farklıdır. Bir araştırmacı, örneğin, haberci RNA'yı (mRNA) incelemek isteyebilir ve sadece bu genetik materyali çıkarmak için bir örnekle çalışabilir. Bilimsel tedarikçiler tarafından yapılan çeşitli ürünleri kullanarak, toplam RNA izolasyonu için bir takım laboratuar protokolleri bulunmaktadır.

Tüm hücresel RNA'yı bir doku numunesinden toplamanın bir çok avantajı olabilir. Daha saf ve kullanılabilir bilgiler verebilir. Bu teknik aynı zamanda araştırmacıların deneylerde sorunlara yol açabilecek bozulmayı kontrol etmesine izin verebilir. Örnek düşük kalitede ise, araştırmacı daha temiz ve daha faydalı bir RNA toplaması elde etmek için tekrar RNA alabilir. Bu, başlangıçtaki zayıf RNA'nın çizgi üzerinde deneylerde sorunlara neden olduğu birçok araştırma türü için önemli olabilir.

Toplam RNA izolasyonu için teknikler çeşitli kimyasal ajanlar içerebilir. Bazıları, numuneye zarar gelme riskini azaltmak için toksik olmayan kimyasalların kullanılmasına odaklanır. Bu tür kimyasallar ayrıca RNA'nın aşağı akım kirliliğini de sınırlar ve laboratuvar çalışanları için daha güvenlidir. Laboratuvarlar, tüm personele önerilecek özel bir kimyasal madde ve protokol seçme eğilimindedir ve kılavuzlarındaki toplam RNA izolasyon prosedürünün ayrıntılı bir açıklamasını içerir. Bu, tesiste RNA işlemede tutarlılığı ve daha kararlı ve faydalı sonuçlar vermesini sağlar.

İşlem, toplam RNA'yı çıkarmak için hangi kimyasal reaktiflerin tedaviye hazır hale getirilmesi için boyut olarak değişebilen bir doku numunesinin hazırlanması ile başlar. Teknisyenler, numunenin nasıl işleneceğini ve RNA'yı izole etmek için nasıl muamele edileceğini belirlemek için laboratuvar el kitabına bakın. Numunenin kalitesini kontrol etmek için elektroforez plakaları gibi araçlar kullanabilir, toplam RNA izolasyon prosesinde bir problem olduğunu gösterebilecek bozulma belirtileri arayabilirler.

Araştırmacılar kendi toplam RNA izolasyonlarını yapabilir veya bu görevi bir laboratuvar asistanına, yüksek lisans öğrencisine veya benzer bir laboratuvar çalışanına devredebilir. İzolasyonu diğer laboratuar tesisleriyle daraltmak da mümkündür. Bu bazen doğrulanabilir ve tekrarlanabilir sonuçlar üretmek için üçüncü bir taraf kullanarak bir deneyin bütünlüğünü korumak için gerekli olabilir. İzole RNA ile araştırmaya dayanan herhangi bir bilimsel makalede, araştırmacı izolasyonu için kullanılan yöntemi ve çalışmayı kimin yaptığını tartışmalıdır.