Co je to umělý chromový chrom?
Kvasinkový umělý chromozom (YAC) je umělý samoreplikující se chromozom, který může být vložen do kvasinkových buněk pro reprodukci, jak buňky rostou a dělí se. V genetickém výzkumu mohou lidé potřebovat velká množství genetického materiálu a kvasnicový umělý chromozom může být užitečným nástrojem klonování. To je důležité pro sekvenování a mapování genetického materiálu a také pro amplifikaci DNA pro testování. Laboratoře si mohou vytvořit vlastní YAC nebo si je mohou objednat od vědeckých dodavatelů, kteří mohou za poplatek vložit požadovaný materiál.
Aby produkovali kvasinky umělé chromozomy, technici ošetřují segment DNA, aby jej rozbili a extrahovali sledovanou složku, fragment genetického materiálu. To lze vložit do vektoru se všemi potřebnými zařízeními pro vytvoření plně umělého chromozomu. Genetický materiál může být replikován během normálního procesu dělení buněk, jakmile jsou na něj buňky kvasinek inokulovány. Jak kolonie roste, rostou i kopie požadovaného fragmentu DNA vytvořeného kvasinkovým umělým chromozomem.
Aby byl kvasinkový umělý chromozom úspěšný, jsou kromě fragmentu DNA zapotřebí tři složky. Prvním z nich jsou telomery, které omezují poškození na koncích DNA, aby se zajistilo správné kopírování. Další je centroméra, která vytváří bod připojení pro vlákna vřetena použitá při dělení buněk k orientaci a dělení chromozomů. Konečně, počátek replikace poskytuje výchozí bod pro replikaci DNA. Tyto faktory zajišťují, že kvasinky mohou úspěšně kopírovat cizí chromozom.
Vektory umožňují vědcům vložit fragmenty DNA různých délek do kvasinkových kolonií. Kvasinky, které exprimují požadovanou DNA, mohou být izolovány a kultivovány, aby podpořily další růst a vytvoření dostatečného množství genetického materiálu pro výzkum. S tím v ruce mohou vědci sekvenci fragmentovat, což jim může pomoci určit, co dělá a kde se nachází v celkovém genomu. Zatímco lidská DNA je běžným cílem u kvasinek umělých chromozomů, je také možné použít DNA z jiných organismů.
Laboratoře, které nemají vlastní zařízení, mohou tyto služby uzavřít. Mohou tak také učinit, pokud chtějí nezávislé výsledky, které mohou být replikovány jinými vědci, aby ověřily závěry dosažené ve studii. Použití duplikátů vzorků umělých chromozomů z kvasinek z více zdrojů může prokázat, že nálezy jsou platné. Může také snížit riziko falešných výsledků způsobených kontaminací, problémy se zpracováním a dalšími problémy, které se mohou objevit v laboratoři.