O que é um cromossomo artificial de levedura?
Um cromossomo artificial de levedura (YAC) é um cromossomo auto-replicante projetado que pode ser inserido nas células de levedura para reprodução à medida que as células crescem e se dividem. Na pesquisa genética, as pessoas podem precisar de grandes quantidades de material genético, e um cromossomo artificial de levedura pode ser uma ferramenta útil de clonagem. Isso é importante para sequenciar e mapear material genético, além de ampliar o DNA para testes. Os laboratórios podem criar seus próprios YACs ou encomendá-los a fornecedores científicos que podem inserir o material necessário por uma taxa.
Para produzir cromossomos artificiais de levedura, os técnicos tratam um segmento de DNA para separá-lo e extrair o componente de interesse, um fragmento de material genético. Isso pode ser inserido em um vetor com todo o equipamento necessário para criar um cromossomo totalmente artificial. O material genético pode ser replicado durante o processo normal de divisão celular, uma vez que as células de levedura são inoculadas. À medida que a colônia cresce, o mesmo ocorre com as cópias do fragmento de interesse de DNA, criado pelo cromossomo artificial da levedura.
São necessários três componentes, além do fragmento de DNA, para fazer com que um cromossomo artificial de levedura seja bem-sucedido. O primeiro são os telômeros, que limitam os danos nas extremidades do DNA para garantir que sejam copiados corretamente. A seguir, está o centrômero, que cria um ponto de ligação para as fibras do eixo usadas na divisão celular para orientar e dividir os cromossomos. Finalmente, as sequências de origem da replicação fornecem um ponto de partida para a replicação do DNA. Esses fatores garantem que o fermento possa copiar com sucesso o cromossomo alienígena.
Os vetores permitem aos cientistas inserir fragmentos de DNA de comprimentos variados em colônias de leveduras. O fermento que expressa o DNA desejado pode ser isolado e cultivado para incentivar um crescimento adicional e a geração de material genético suficiente para a pesquisa. Com isso em mãos, os cientistas podem sequenciar o fragmento, e isso pode ajudá-los a determinar o que ele faz e onde está situado dentro do genoma geral. Embora o DNA humano seja um alvo comum dos cromossomos artificiais de leveduras, também é possível usar o DNA de outros organismos.
Os laboratórios que não dispõem de instalações próprias podem contratar esses serviços. Eles também podem fazer isso se quiserem resultados independentes que possam ser replicados por outros pesquisadores para verificar as conclusões alcançadas no estudo. O uso de amostras duplicadas de cromossomos artificiais de levedura de várias fontes pode demonstrar que os resultados são válidos. Também pode reduzir o risco de resultados falsos criados por contaminação, problemas de processamento e outros problemas que possam surgir no laboratório.