Che cos'è un lievito cromosoma artificiale?
Un cromosoma artificiale di lievito (YAC) è un cromosoma autoreplicante che può essere inserito nelle cellule di lievito per la riproduzione mentre le cellule crescono e si dividono. Nella ricerca genetica, le persone potrebbero aver bisogno di grandi quantità di materiale genetico e un cromosoma artificiale di lievito può essere un utile strumento di clonazione. Questo è importante per il sequenziamento e la mappatura del materiale genetico, nonché per l'amplificazione del DNA per i test. I laboratori possono creare i propri YAC o ordinarli da fornitori scientifici che possono inserire il materiale richiesto a pagamento.
Per produrre cromosomi artificiali di lievito, i tecnici trattano un segmento di DNA per scomporlo ed estrarre il componente di interesse, un frammento di materiale genetico. Questo può essere inserito in un vettore con tutte le attrezzature necessarie per creare un cromosoma completamente artificiale. Il materiale genetico può essere replicato durante il normale processo di divisione cellulare dopo l'inoculo delle cellule di lievito. Man mano che la colonia cresce, anche le copie del frammento di DNA di interesse, creato dal cromosoma artificiale del lievito.
Sono necessari tre componenti oltre al frammento di DNA per rendere efficace un cromosoma artificiale di lievito. Il primo sono i telomeri, che limitano i danni alle estremità del DNA per garantire che sia copiato correttamente. Il prossimo è il centromero, che crea un punto di attacco per le fibre del fuso utilizzate nella divisione cellulare per orientare e dividere i cromosomi. Infine, le sequenze di origine della replicazione forniscono un punto di partenza per la replicazione del DNA. Questi fattori assicurano che il lievito possa copiare con successo il cromosoma alieno.
I vettori consentono agli scienziati di inserire frammenti di DNA di varie lunghezze nelle colonie di lieviti. Il lievito che esprime il DNA desiderato può essere isolato e coltivato per incoraggiare la crescita aggiuntiva e la generazione di materiale genetico sufficiente per la ricerca. Con questo in mano, gli scienziati possono sequenziare il frammento e questo può aiutarli a determinare cosa fa e dove si trova all'interno del genoma generale. Mentre il DNA umano è un bersaglio comune con i cromosomi artificiali del lievito, è anche possibile utilizzare il DNA di altri organismi.
I laboratori che non dispongono di strutture per realizzare il proprio possono contrarre questi servizi. Potrebbero anche farlo se desiderano risultati indipendenti che possono essere replicati da altri ricercatori per verificare le conclusioni raggiunte nello studio. L'uso di duplicati di cromosomi artificiali di lievito provenienti da più fonti può dimostrare che i risultati sono validi. Può anche ridurre il rischio di risultati falsi creati da contaminazione, problemi di elaborazione e altri problemi che possono sorgere in laboratorio.