Hva er et elektrospray massespektrometer?

Et massespektrometer (MS) er et elektronisk instrument som brukes til å identifisere kjemisk struktur. I de fleste massespektrometriske prosedyrer blir molekyler elektrisk bombardert, noe som resulterer i ionisering med fragmentering. Fragmentene blir deretter akselerert magnetisk mot deteksjons- og opptaksenheter, noe som resulterer i spesifikke topper og intensiteter forskere kan studere som en slags "molekylær fingeravtrykk." ElectroSpray Mass Spectrometer (EMS) fungerer annerledes - ikke fører til fragmentering. Dette gjør det uvurderlig i studiet av store arter, eller makromolekyler.

Hvis enkel kjemisk binding er alt som må bestemmes, vil sannsynligvis ikke bruk av et elektrospray massespektrometer være nødvendig. For større molekyler som peptider er imidlertid molekylær form og molekylær folding - til og med molekylær interaksjon med omkringliggende molekyler - like viktige. I slike tilfeller er det viktig at molekylet forblir ufraviklet. Delikatessen neEDED krever bruk av et elektrospray -massespektrometer, som ikke krever bruk av verken høye temperaturer eller et vakuum.

Når du bruker et elektrospray-massespektrometer, blir et rent makromolekylært prøve først oppløst i et løsningsmiddelsystem, som neste blir injisert via smalborede nål i et høyspent elektrisk felt. Løsningsmidlet i stedet for oppløsningen mottar bombardementets stykke. Når væsken når et kritisk ladningsnivå, bryter løsningen fra hverandre voldsomt i dråper i aerosolstørrelse, og ladningen deres får dem individuelt til å avvise hverandre. Snart fordamper dråpene og avsetter flere ladninger på de fremdeles intakte molekylene, som gjennom intermolekylær frastøtning utvides. I denne tilstanden kan deres struktur, selv ved høye nivåer av kompleksitet, studeres og bestemmer.

Det første vellykkede intakte proteinspekteret ble produsert i 1989 avForskere ved Yale University i Connecticut. Avansement i EMS -teknikk var rask, og i 1996 oppdaget kjemikeren Carol Robinson spektrale topper som kunne assosieres, ikke bare med en enkelt struktur, men med et kompleks av protein med koenzym. En hovedforbedring siden den gang er koblingen av elektrospray-massespektrometeret med TOF) -analyse (TOF). Kollisjonskjøling tar selv den forbedringen et skritt videre ved å redusere fragmenteringen av enorme strukturer produsert av varme.

En vanskelighetsgrad som er opplevd i bestemmelser om elektrospray massespektrometer er det som er introdusert av elementære isotoper. Dette er fordi topper er avhengig av masse-til-ladningsforhold. Massen til et fragment eller et molekyl, delt på antall diskrete ladninger det bærer, bestemmer plasseringen. Ulike elementære isotoper bidrar med forskjellige masser, kanskje den mest kritiske variansen er den mellom karbon-12 og karbon-13. Av denne grunn skal prøver av komplekse molekyler Be monoisotopic hvis mulig.