O que é um espectrômetro de massa de electropray?
Um espectrômetro de massa (MS) é um instrumento eletrônico usado para identificar a estrutura química. Na maioria dos procedimentos espectrométricos de massa, as moléculas são eletricamente bombardeadas, resultando em ionização com fragmentação. Os fragmentos são acelerados magneticamente em direção a dispositivos de detecção e gravação, resultando em picos e intensidades específicos que os pesquisadores podem estudar como uma espécie de "impressão digital molecular". O espectrômetro de massa de electropulverização (EMS) funciona de maneira diferente - não levando à fragmentação. Isso o torna inestimável no estudo de espécies grandes, ou macromoléculas. Para moléculas maiores, como peptídeos, no entanto, a forma molecular e a dobra molecular - até a interação molecular com as moléculas circundantes - são tão importantes. Nesses casos, é essencial que a molécula permaneça sem engajamento. A iguaria neO GODED exige o uso de um espectrômetro de massa de eletropulverização, que não requer o uso de altas temperaturas ou um vácuo.
Ao usar um espectrômetro de massa de eletropulverização, uma amostra macromolecular pura é dissolvida pela primeira vez em um sistema de solvente, que é injetado a seguir através da agulha de esburicamento estreito em um campo elétrico de alta tensão. O solvente e não o soluto recebe o peso do bombardeio. À medida que o líquido atinge um nível crítico de carga, a solução se separa violentamente em gotículas do tamanho de aerossol, sua carga, fazendo com que elas se repelam individualmente. Logo as gotículas evaporam, depositando suas múltiplas acusações nas moléculas ainda intactas, que através da repulsão intermolecular se estendem. Nesse estado, sua estrutura, mesmo em altos níveis de complexidade, pode ser estudada e determinada.
O primeiro espectro de proteína intacto de sucesso foi produzido em 1989 porPesquisadores da Universidade de Yale em Connecticut. O avanço na técnica do EMS foi rápido e, em 1996, o químico Carol Robinson detectou picos espectrais que poderiam ser associados, não apenas a uma única estrutura, mas a um complexo de proteína com coenzima. Uma grande melhoria desde então é o acoplamento do espectrômetro de massa de electropulverização com análise de tempo de voo (TOF). O resfriamento colisional leva até a melhoria um passo adiante, reduzindo a fragmentação de imensas estruturas produzidas pelo calor.
Uma dificuldade experimentada nas determinações do espectrômetro de massa de eletropulverização é a introduzida por isótopos elementares. Isso ocorre porque os picos dependem da taxa de massa / carga. A massa de um fragmento ou molécula, dividida pelo número de cargas discretas que carrega, determina a localização. Diferentes isótopos elementares contribuem com diferentes massas, talvez a variação mais crítica seja a entre carbono-12 e carbono-13. Por esse motivo, amostras de moléculas complexas devem sere monoisotópico, se possível.