Co to jest białko rekombinowane?
Rekombinowane białko to dowolne białko wytworzone z rekombinowanego kwasu dezoksyrybonukleinowego (DNA). DNA przechowuje całą informację genetyczną organizmu i przekazuje tę informację poprzez ekspresję białka. Rekombinowany DNA to rodzaj DNA, który został zmanipulowany w celu włączenia DNA innego organizmu. Kiedy nowe DNA jest transkrybowane i translowane w celu wytworzenia białka, powstaje białko rekombinowane.
Białka są budulcem życia. Każda cecha widoczna u człowieka - taka jak kolor włosów, kolor oczu, a nawet wzrost - zależy od produkcji białka. Wiele funkcji organizmu jest również wynikiem produkcji białka. Obejmuje to produkcję insuliny i funkcjonowanie układu odpornościowego. Wady genetyczne u ludzi można czasem leczyć, tworząc rekombinowane białka w laboratorium, które może leczyć te stany.
Gdy gospodarzem rekombinowanego DNA jest organizm, który szybko się rozmnaża, taki jak bakterie, można wytworzyć masowe ilości rekombinowanego białka. Ta technika, zwana amplifikacją, jest szeroko stosowana w procesach klonowania i terapii genowej. Inni gospodarze obejmują drożdże, grzyby, a nawet komórki ssacze. Rodzaj niezbędnego gospodarza zależy od zamierzonego zastosowania i potrzebnej ilości rekombinowanego białka.
Po wybraniu hosta można wybrać wektor. Wektor jest nośnikiem, który służy do wprowadzenia docelowego DNA do DNA gospodarza. Wektory są ogólnie zmodyfikowaną wersją wirusa lub bakterii.
Niektóre wektory są specjalnie zaprojektowanymi fragmentami DNA przyłączonymi do niekodującego regionu. Tego rodzaju wektory są zwykle stosowane do białek fuzyjnych. Białka fuzyjne powstają z kawałków DNA, które normalnie nie są ze sobą połączone. Są one umieszczane w tym samym wektorze dla łatwiejszej transfekcji.
Wszystkie wektory mają jeden lub więcej różnych znaczników. Znaczniki te stosuje się do rozpoznania podczas etapu oczyszczania w procesie wytwarzania rekombinowanego białka. Gdy roztwór zawierający wektory wlewa się na specjalną kolumnę, znaczniki przyklejają się do kolumny w różnych miejscach i można je oddzielić od innych części DNA. Zapewnia to wstawienie prawidłowego DNA i wektorów do gospodarza.
Po transfekcji gospodarz może następnie podzielić i rozpocząć wytwarzanie pożądanego rekombinowanego białka. Te komórki gospodarza można hodować w warunkach laboratoryjnych, a białko można zbierać w miarę produkcji. Białka te są następnie oczyszczane do stosowania u ludzi lub innych ssaków. Bakteryjni gospodarze często nie wytwarzają wszystkich części ludzkiego białka. Białka te można modyfikować w laboratorium po oczyszczeniu.