¿Qué son los plásmidos?
Dentro de muchas bacterias diferentes, se pueden encontrar pequeñas piezas circulares de ADN en el citoplasma. Estos círculos de ADN se conocen como plásmidos, y están separados del ADN cromosómico, o el ADN que transporta los genes para las células de bacterias. Varias copias de los plásmidos a menudo están presentes en cualquier momento en la célula bacteriana. Los plásmidos juegan un papel muy importante en la ingeniería genética, particularmente en la clonación de genes.
Cuando los genes se clonan, el proceso generalmente tiene lugar dentro de las bacterias. Para obtener el gen que se va a clonar en la bacteria, es necesario un vector. Un plásmido es lo que se usa como vector, ya que puede pasar fácilmente de una célula a otra.
Hay una serie de pasos involucrados en la clonación de genes antes de insertar un plásmido en una célula huésped. Primero, el gen que se va a copiar debe aislarse, al igual que los plásmidos que deben usarse como vectores. Una vez hecho esto, el gen debe insertarse en el ADN del plásmido. El plásmido se inserta en los bacteriasAL Célula huésped para la replicación.
Para aislar los plásmidos de las células bacterianas, las células deben tratarse inicialmente con enzimas para descomponer las paredes celulares de las bacterias. El ADN cromosómico más grande es el separado de los plásmidos más pequeños usando una centrífuga. El ADN del plásmido aislado ahora está listo para insertar el gen.
Los plásmidos están formados por un círculo de ADN de doble cadena. Para insertar el gen deseado, el ADN del plásmido se corta con enzimas de restricción. Estas enzimas solo cortan el ADN en secuencias de nucleótidos muy específicas. Una vez que se ha cortado el ADN del plásmido, se agregan secuencias de enlazador a los extremos sueltos que se correlacionan con los extremos del gen a insertar. Esto asegura que el gen se ajuste con precisión al plásmido.
Una vez que el gen se ha insertado en el plásmido, ahora está listo para insertarse en una bacteria viva. Las bacterias replican sus plásmidos para que una sola célula puedacontienen muchas copias. Puede haber hasta 200 copias de un solo plásmido dentro de una bacteria. Si el plásmido se introduce en muchas células bacterianas, muchas copias del gen se pueden producir relativamente rápido, particularmente a medida que las células de bacterias se replican aproximadamente cada 20 minutos.
Este es el proceso que se utiliza para crear insulina humana. El gen que codifica la insulina se aisló e insertó en un plásmido. Todos los plásmidos que contienen el gen de la insulina se introdujeron en una bacteria, donde fueron replicados. Luego, la bacteria continuó replicándose, de modo que muchos millones de células que contienen el gen de la insulina se pueden crear en muy poco tiempo. Este gen clonado ahora proporciona una fuente confiable para la insulina humana.