O que são plasmídeos?

Em muitas bactérias diferentes, pequenos pedaços circulares de DNA podem ser encontrados no citoplasma. Esses círculos de DNA são conhecidos como plasmídeos e são separados do DNA cromossômico, ou do DNA que carrega os genes para as células de bactérias. Várias cópias dos plasmídeos geralmente estão presentes a qualquer momento na célula bacteriana. Os plasmídeos desempenham um papel muito importante na engenharia genética, particularmente na clonagem de genes.

Quando os genes são clonados, o processo geralmente ocorre nas bactérias. Para obter o gene que deve ser clonado nas bactérias, é necessário um vetor. Um plasmídeo é o que é usado como vetor, pois pode passar facilmente de uma célula para outra.

Existem várias etapas envolvidas na clonagem de genes antes de inserir um plasmídeo em uma célula hospedeira. Primeiro, o gene a ser copiado deve ser isolado, assim como os plasmídeos que devem ser usados ​​como vetores. Uma vez feito isso, o gene deve ser inserido no DNA do plasmídeo. O plasmídeo é então inserido nos bacteriCélula hospedeira AL para replicação. O DNA cromossômico maior é o separado dos plasmídeos menores usando uma centrífuga. O DNA do plasmídeo isolado está agora pronto para inserir o gene nele.

Os plasmídeos são compostos por um círculo de DNA de fita dupla. Para inserir o gene desejado, o DNA do plasmídeo é cortado com enzimas de restrição. Essas enzimas cortam apenas o DNA em sequências nucleotídicas muito específicas. Uma vez que o DNA do plasmídeo foi cortado, as seqüências de ligante são adicionadas às extremidades soltas que se correlacionam com as extremidades do gene a serem inseridas. Isso garante que o gene se encaixe exatamente no plasmídeo.

Depois que o gene foi inserido no plasmídeo, agora está pronto para ser inserido em uma bactéria viva. Bactérias replicam seus plasmídeos para que uma única célula possacontêm muitas cópias. Pode haver até 200 cópias de um único plasmídeo em uma bactéria. Se o plasmídeo for introduzido em muitas células bacterianas, muitas cópias do gene podem ser produzidas relativamente rapidamente, principalmente porque as células de bactérias se replicam a cada 20 minutos.

Este é o processo usado para criar insulina humana. A codificação do gene da insulina foi isolada e inserida em um plasmídeo. Todos os plasmídeos contendo o gene da insulina foram então introduzidos em uma bactéria, onde foram replicados. As bactérias continuaram a se replicar, para que muitos milhões de células que contêm o gene da insulina possam ser criadas em um tempo muito curto. Este gene clonado agora fornece uma fonte confiável para a insulina humana.