¿Qué es un espectrómetro de masas de cromatografía líquida?
Un espectrómetro de masas por cromatografía líquida (LC-MS) es un dispositivo utilizado en química analítica para determinar el contenido de una sustancia de muestra. Lo hace combinando dos técnicas diferentes: cromatografía líquida y espectrometría de masas. La primera de estas técnicas, la cromatografía líquida, se utiliza para separar la muestra en sus componentes químicos. La espectrometría de masas se utiliza para recopilar información sobre la masa de cada componente. El espectrómetro de masas de cromatografía líquida puede proporcionar lecturas altamente sensibles y tiene usos en muchos campos diferentes, incluida la investigación farmacéutica y la toxicología forense.
La cromatografía líquida es la primera técnica empleada por el espectrómetro de masas por cromatografía líquida. La solución de muestra, que está en fase líquida, se drena a través de una columna que contiene una sustancia en fase estacionaria, por ejemplo, un sólido poroso. Dado que los diferentes tipos de partículas en la solución de muestra pasan a través de la fase estacionaria a diferentes velocidades, se separan en bandas.
La separación en la columna puede ocurrir de varias maneras. Si las moléculas de una sustancia son más grandes que las moléculas de otra, tardan más en drenar a través de un material poroso y, por lo tanto, se separan de las moléculas más pequeñas, que se mueven más rápido. Los factores químicos también pueden afectar la velocidad de flujo. Por ejemplo, las moléculas polares, aquellas que tienen una carga eléctrica parcial, pueden ser atraídas por la carga de la fase estacionaria y volverse "pegajosas", fluyendo menos rápidamente a través de la columna.
El espectrómetro de masas de cromatografía líquida pasa cada banda de material separado a través de una luz ultravioleta y detecta su absorbancia. En otras palabras, registra cuánta luz y qué longitudes de onda de luz absorbe la sustancia. Esta información a menudo se puede usar para identificar una sustancia. En los casos en que se necesitan más datos, las partículas pueden analizarse más a fondo utilizando la porción del espectrómetro de masas del dispositivo.
Las partículas que se han separado por tipo de fase de cromatografía líquida se separan por masa en la fase de espectrometría de masas. Primero, las partículas se ionizan, o cargan, eliminando electrones, dándoles una carga general positiva. Luego se usa un campo magnético para "doblar" el camino de la partícula cargada a medida que pasa a través del dispositivo. Las partículas con mayor masa no se mueven tan fácilmente como las partículas más pequeñas y ligeras, por lo que no se desvían tanto. El espectrómetro de masas registra eléctricamente la cantidad de cada tipo de partícula que llega al detector con éxito.
La ventaja del espectrómetro de masas por cromatografía líquida es que puede registrar, con gran sensibilidad, el tipo y la masa de cada componente químico de una muestra. A menudo se usa para analizar muestras orgánicas complejas en investigación farmacológica y en proteómica, el estudio de proteínas. El espectrómetro de masas de cromatografía líquida incluso se ha refinado para su uso en toxicología forense, para analizar e identificar muestras que de otro modo serían demasiado frágiles para estudiar.