O que é um espectrômetro de massa por cromatografia líquida?
Um espectrômetro de massa de cromatografia líquida (LC-MS) é um dispositivo usado na química analítica para determinar o conteúdo de uma substância da amostra. Isso é feito combinando duas técnicas diferentes: cromatografia líquida e espectrometria de massa. A primeira dessas técnicas, cromatografia líquida, é usada para separar a amostra em seus componentes químicos. A espectrometria de massa é então usada para coletar informações sobre a massa de cada componente. O espectrômetro de massa para cromatografia líquida pode fornecer leituras altamente sensíveis e tem usos em muitos campos diferentes, incluindo pesquisa farmacêutica e toxicologia forense.
A cromatografia líquida é a primeira técnica empregada pelo espectrômetro de massa de cromatografia líquida. A solução da amostra, que está na fase líquida, é drenada através de uma coluna contendo uma substância da fase estacionária - por exemplo, um sólido poroso. Como os diferentes tipos de partículas na solução da amostra passam pela fase estacionária a taxas diferentes, eles se separam em faixas.
A separação na coluna pode ocorrer de várias maneiras. Se as moléculas de uma substância são maiores que as moléculas de outra, elas levam mais tempo para drenar através de um material poroso e, portanto, se separam das moléculas menores, que se movem mais rapidamente. Fatores químicos também podem afetar a taxa de fluxo. Por exemplo, moléculas polares - aquelas que têm carga elétrica parcial - podem ser atraídas para a carga da fase estacionária e se tornarem "pegajosas", fluindo menos rapidamente pela coluna.
O espectrômetro de massa de cromatografia líquida passa cada faixa de material separado por uma luz ultravioleta e detecta sua absorvância. Em outras palavras, ele registra quanta luz e quais comprimentos de onda a substância absorve. Essa informação geralmente pode ser usada para identificar uma substância. Nos casos em que são necessários mais dados, as partículas podem ser analisadas ainda mais usando a parte do espectrômetro de massa do dispositivo.
As partículas que foram separadas por tipo na fase de cromatografia líquida são separadas por massa na fase de espectrometria de massa. Primeiro, as partículas são ionizadas, ou carregadas, removendo elétrons, dando-lhes uma carga geral positiva. Um campo magnético é então usado para "dobrar" o caminho da partícula carregada quando ela passa pelo dispositivo. As partículas com maior massa não são tão facilmente movidas quanto as partículas mais leves e menores; portanto, não são desviadas até o momento. O espectrômetro de massa registra eletricamente a quantidade de cada tipo de partícula que atinge o detector com sucesso.
A vantagem do espectrômetro de massa por cromatografia em fase líquida é que ele pode registrar, com grande sensibilidade, o tipo e a massa de cada componente químico de uma amostra. É frequentemente usado para analisar amostras orgânicas complexas em pesquisas farmacológicas e em proteômica, no estudo de proteínas. O espectrômetro de massa de cromatografia líquida foi refinado para uso em toxicologia forense, para analisar e identificar amostras que, de outra forma, seriam muito frágeis para serem estudadas.