Hvad er et flydende kromatografi-massespektrometer?
Et flydende kromatografimassespektrometer (LC-MS) er en anordning, der anvendes i analytisk kemi til at bestemme indholdet af et prøvestof. Det gør dette ved at kombinere to forskellige teknikker: flydende kromatografi og massespektrometri. Den første af disse teknikker, flydende kromatografi, bruges til at adskille prøven i dens kemiske komponenter. Massespektrometri bruges derefter til at indsamle information om massen af hver komponent. Væskekromatografimassespektrometeret kan give meget følsomme aflæsninger og har anvendelser inden for mange forskellige områder, herunder farmaceutisk forskning og retsmedicinsk toksikologi.
Flydende kromatografi er den første teknik, der anvendes af væskekromatografimassespektrometer. Prøveopløsningen, som er i en flydende fase, drænes gennem en søjle, der indeholder et stationært fasestof - for eksempel et porøst fast stof. Da de forskellige typer partikler i prøveopløsningen passerer gennem den stationære fase i forskellige hastigheder, adskilles de i bånd.
Adskillelse i kolonnen kan ske på flere måder. Hvis molekylerne i et stof er større end molekylerne fra et andet, tager det længere tid at dræne gennem et porøst materiale og derfor adskilles fra de mindre molekyler, der bevæger sig hurtigere. Kemiske faktorer kan også påvirke strømningshastigheden. For eksempel kan polære molekyler - dem, der har en delvis elektrisk ladning - blive tiltrukket af ladningen af den stationære fase og blive "klæbrige", som flyder mindre hurtigt gennem søjlen.
Væskekromatografimassespektrometer passerer hvert bånd af adskilt materiale gennem et ultraviolet lys og detekterer dets absorbans. Med andre ord registrerer det, hvor meget lys, og hvilke bølgelængder af lyset, stoffet optager. Disse oplysninger kan ofte bruges til at identificere et stof. I tilfælde, hvor flere data er nødvendige, kan partikler analyseres yderligere ved hjælp af enhedens massespektrometerdel.
Partiklerne, der er blevet adskilt efter type flydende kromatografifase, adskilles med masse i massespektrometrifasen. Først ioniseres eller lades partiklerne ved at fjerne elektroner, hvilket giver dem en positiv samlet ladning. Et magnetfelt bruges derefter til at "bøje" banen til den ladede partikel, når den passerer gennem enheden. Partikler med større masse flyttes ikke så let som lettere, mindre partikler, så de afbøjes ikke så langt. Massespektrometret registrerer elektrisk mængden af hver type partikel, der når detektoren med succes.
Fordelen ved væskekromatografimassespektrometeret er, at det med stor følsomhed kan registrere typen og massen af hver kemisk komponent i en prøve. Det bruges ofte til at analysere komplekse organiske prøver i farmakologisk forskning og i proteomics, studiet af proteiner. Væskekromatografimassespektrometeret er endda blevet raffineret til brug i retsmedicinsk toksikologi for at analysere og identificere prøver, der ellers ville være for skrøbelige til at undersøge.