Qu'est-ce qu'un spectromètre de masse de chromatographie liquide?
Un spectromètre de masse de chromatographie liquide (LC-MS) est un appareil utilisé en chimie analytique pour déterminer le contenu d'une substance échantillon. Il le fait en combinant deux techniques différentes: la chromatographie liquide et la spectrométrie de masse. La première de ces techniques, la chromatographie liquide, est utilisée pour séparer l'échantillon en ses composants chimiques. La spectrométrie de masse est ensuite utilisée pour recueillir des informations sur la masse de chaque composant. Le spectromètre de masse de chromatographie liquide peut donner des lectures très sensibles et a des utilisations dans de nombreux domaines différents, notamment la recherche pharmaceutique et la toxicologie légale.
La chromatographie liquide est la première technique utilisée par le spectromètre de masse de chromatographie liquide. La solution d'échantillon, qui est en phase liquide, est drainée par une colonne contenant une substance en phase stationnaire - par exemple, un solide poreux. Étant donné que les différents types de particules dans la solution d'échantillon passent à travers la phase stationnaire à différents taux, thEy se sépare en bandes.
La séparation dans la colonne peut se produire de plusieurs façons. Si les molécules d'une substance sont plus grandes que les molécules d'un autre, elles mettent plus de temps à s'écouler à travers un matériau poreux et donc séparées des molécules plus petites, qui se déplacent plus rapidement. Les facteurs chimiques peuvent également affecter le taux d'écoulement. Par exemple, les molécules polaires - celles qui ont une charge électrique partielle - peuvent être attirées par la charge de la phase stationnaire et devenir «collantes», coulant moins rapidement à travers la colonne.
Le spectromètre de masse de chromatographie liquide passe chaque bande de matériau séparé à travers une lumière ultraviolette et détecte son absorbance. En d'autres termes, il enregistre combien de lumière et quelles longueurs d'onde de lumière, la substance absorbe. Ces informations peuvent souvent être utilisées pour identifier une substance. Dans les cas où plus de données sont nécessaires, les particules peuvent être plusNalyzed à l'aide de la partie du spectromètre de masse de l'appareil.
Les particules qui ont été séparées par la phase de chromatographie liquide sont séparées par la masse dans la phase de spectrométrie de masse. Premièrement, les particules sont ionisées ou chargées, en éliminant les électrons, leur donnant une charge globale positive. Un champ magnétique est ensuite utilisé pour «plier» le chemin de la particule chargée lorsqu'il traverse l'appareil. Les particules avec une plus grande masse ne sont pas aussi facilement déplacées que des particules plus légères et plus petites, de sorte qu'elles ne sont pas déviées aussi loin. Le spectromètre de masse enregistre électriquement la quantité de chaque type de particules qui atteint le détecteur avec succès.
L'avantage du spectromètre de masse de chromatographie liquide est qu'il peut enregistrer, avec une grande sensibilité, le type et la masse de chaque composant chimique d'un échantillon. Il est souvent utilisé pour analyser des échantillons organiques complexes dans la recherche pharmacologique et en protéomique, l'étude des protéines. Le spectromètre de masse de chromatographie liquide a même bEen a affiné pour une utilisation en toxicologie médico-légale, pour analyser et identifier des échantillons qui seraient autrement trop fragiles pour étudier.