O que é um antígeno peptídico?
Um antígeno peptídico é o uso de um peptídeo para acionar o sistema imunológico de um animal para desenvolver anticorpos para esse peptídeo. Peptídeos são cadeias curtas de aminoácidos; cadeias mais longas são conhecidas como proteínas. Um antígeno peptídico pode ser usado como parte do desenvolvimento de uma vacina.
Os peptídeos são moléculas orgânicas compostas de nitrogênio, oxigênio, carbono, hidrogênio e geralmente enxofre. São cadeias de aminoácidos e estão ligadas por uma ligação peptídica. As ligações peptídicas são ligações dos grupos NH2 e COOH dos dois aminoácidos adjacentes um ao outro.
Um antígeno é uma molécula que se liga a um anticorpo e gera uma resposta imune, a reação do corpo a moléculas que parecem estranhas. Nem todos os tipos de moléculas são capazes de serem reconhecidos pelo sistema imunológico. Proteínas, peptídeos e cadeias de açúcares podem atuar como antígenos.
Existem também antígenos humanos. Isso inclui proteínas que estão presentes na superfície das células tumorais. Esses antígenos também podem estar presentes no sangue. Essa é a base por trás do teste de antígeno específico da próstata, que é comumente usado para rastrear o câncer de próstata. Alguns antígenos são introduzidos intencionalmente para atuar como vacinas e gerar uma resposta imune.
Anticorpos são proteínas no sangue que neutralizam um antígeno específico. Apenas algumas partes de uma molécula são reconhecidas por um anticorpo. A ponta do anticorpo contém um paratopo que reconhece a estrutura complexa do antígeno. Essa região do anticorpo é responsável pela grande diversidade de anticorpos presentes em um organismo. Um indivíduo pode ter milhões de anticorpos diferentes.
Freqüentemente, antígenos peptídicos são usados porque fazem parte de uma proteína maior, que pode não ter sido purificada. Ao usar um antígeno peptídico para produzir anticorpos, é importante que um pesquisador use uma seção antigênica do peptídeo. Os especialistas em antígeno podem ajudar no projeto do antígeno para maximizar as chances de o peptídeo usado como antígeno gerar um anticorpo. É muito mais fácil prever quais epítopos estão expostos se alguém tiver conhecimento da estrutura tridimensional do composto.
Na maioria dos casos, não há conhecimento da estrutura geral do peptídeo, embora o software preditivo possa analisar qual seção do peptídeo provavelmente é antigênica. Os peptídeos com maior probabilidade de encontrar um anticorpo são aqueles na superfície da célula. É provável que sejam hidrofílicos - solúveis em água. A flexibilidade também é um critério importante para um antígeno peptídico reagir com um epítopo.
Uma vez identificado um antígeno peptídico adequado, é criado um peptídeo sintético. Pode então ser utilizado na imunização. É injetado em um animal para gerar uma resposta imune. Depois que os anticorpos foram isolados, eles são analisados para garantir que o organismo tenha uma resposta imune eficaz.
Uma maneira comum de testar para verificar se os anticorpos são específicos para a proteína desejada é realizar um Western Blot. Isso envolve a separação das proteínas que contêm o peptídeo em um gel usando uma corrente elétrica. Isso é chamado de eletroforese. Em seguida, as proteínas são transferidas para uma membrana e sondadas com o anticorpo.
Se houver anticorpo específico para a proteína, ele se ligará à proteína na membrana. A membrana é lavada e depois tratada com um anticorpo secundário. Se os anticorpos fossem desenvolvidos em um camundongo, por exemplo, o anticorpo secundário seria um anticorpo anti-camundongo. Este anticorpo é projetado para gerar cor ou luminescência, para que o pesquisador possa ver onde o anticorpo original se ligou.