O que é expressão de proteína recombinante?
A expressão da proteína recombinante é a fabricação de uma proteína derivada do DNA recombinante. É uma técnica comum na biologia molecular e na produção farmacêutica de substituições de hormônios. O DNA recombinante é uma porção específica de um gene projetado para expressar um único produto em uma célula hospedeira, guiada por fatores químicos especiais, para que a proteína direita seja expressa em grandes quantidades. Muitos hormônios e enzimas que foram historicamente derivados de fontes animais agora são sintetizados pela expressão de proteínas recombinantes e depois colhidas e refinadas das células hospedeiras.
para expressar proteínas recombinantes, sequências de DNA cuidadosamente selecionadas devem ser introduzidas no genoma de um hospedeiro. Tomar partes do código genético de um organismo e colocá -las nos núcleos celulares de outro é uma forma de clonagem. Isso é feito através da inserção de uma sequência de DNA recombinante que codifica a proteína desejada no núcleo, que inicia a expressão do gene, transcrevendo -o para RNA. As proteínas recombinantes são montadas quando peças de mRNA transportando informações do DNA migram para os ribossomos do núcleo da célula, e lá iniciam a produção de uma proteína de acordo com um modelo específico.
As células hospedeirasproduzirão quantidades insuficientes de uma proteína recombinante, a menos que o DNA seja introduzido com vetores apropriados para que a informação genética correta seja expressa em quantidade suficiente. Os fatores de expressão proteica são os sinais moleculares que devem acompanhar o DNA recombinante quando for inserido nas células hospedeiras para garantir que a proteína alvo seja super-expressa. Esta é a única maneira de a expressão de proteína recombinante pode fazer uma substância suficiente para uso farmacêutico ou laboratório.
A montagem da proteína ribossômica não completa o processo de expressão de proteínas porque, durante a colheita, o conteúdo de células bacterianas ou de levedura é misturado com o EProduto ND. As proteínas recombinantes expressas devem ser purificadas pela separação das peças de partes celulares destruídas. Às vezes, uma etiqueta molecular rotula a proteína para que possa se ligar a uma substância metálica ou outra e ser isolada dos resíduos. Existem diferentes técnicas, dependendo de fatores como o tamanho da proteína e a complexidade da célula hospedeira.
A expressão de proteínas recombinantes humanas possui extensas aplicações comerciais e médicas. Muitos hormônios, anticorpos e enzimas foram extraídos anteriormente do tecido animal ou cadáver, mas agora são produzidos sinteticamente usando a tecnologia de DNA recombinante. Dois exemplos especialmente importantes são o hormônio do crescimento humano e a insulina. Muitas terapias de reposição hormonal dependem de proteínas sintéticas, assim como vários ensaios usados por biólogos moleculares e celulares em seus laboratórios. Em muitos casos, as bactérias são usadas como células hospedeiras para produtos simples, enquanto a expressão mais complexa de proteínas recombinantes, especialmente de genes de animais, pode ser feita em fungose leveduras.