Co je to Antibiogram?
Antiogramový test lze použít pro dva různé účely. Metoda Kirby-Bauer se používá k testování citlivosti bakteriálního kmene na různá antibiotika. Antibiogramy mohou také stanovit minimální inhibiční koncentraci (MIC) nebo nejmenší koncentraci antibiotika, které bude inhibovat růst bakteriálního kmene, za použití metody ředění.
Metoda Kirby-Bauer je antibiogram používaný k určení nejlepšího antibiotika, které se má použít proti určitému bakteriálnímu kmenu. Testy se provádějí v Petriho miskách, což jsou mělké, kulaté, zakryté misky naplněné agarovým médiem nebo gelovitou látkou naplněnou živinami, aby se podpořil bakteriální růst. Bakteriální kmen, který má být testován, je rovnoměrně rozprostřen po povrchu destičky. Několik kruhových papírových disků, z nichž každý je naplněn jiným antibiotikem, je rovnoměrně rozmístěno po povrchu destičky a jemně zatlačeno dolů do agaru, aby došlo k kontaktu s bakteriemi. Destičky se pak nechají růst v inkubátoru přes noc.
Po inkubaci přes noc obklopí každý papírový kotouč kruhová oblast bez bakteriálního růstu. Tato oblast se nazývá inhibiční zóna. Průměr zóny inhibice pro každý disk je změřen a porovnán s kontrolním diagramem, aby se stanovilo, zda je testovaný bakteriální kmen rezistentní, střední nebo citlivý na každé z různých antibiotik. Velká inhibiční zóna by znamenala, že bakteriální kmen je citlivý na antibiotikum na testovacím disku.
Zřeďovací metoda je antibiogram používaný k určení nejúčinnější koncentrace antibiotika, která se má použít proti kmenu bakterií. Začíná kultivací nebo pěstováním čerstvé šarže testované bakterie přes noc a poté kontrolou nových kultur z hlediska čistoty nebo čištění kultury. Připraví se také dvě kontrolní nebo srovnávací bakterie. Koncentrace bakteriálního kmene se stanoví spektrofotometrem a koncentrace se upraví do rozsahu vhodného pro metodu ředění.
Sériové ředění antibiotik, která mají být testována, se připravuje zvyšováním a odstupňovanými změnami koncentrace v různých lahvičkách. Jedna řada různých koncentrací antibiotik se naočkuje stejnými množstvími jako testovaný bakteriální kmen a druhá řada se naočkuje kontrolními bakteriálními kmeny. Všechny naočkované koncentrace antibiotik se nechají růst přes noc v inkubátoru nebo dokud není pozorován viditelný bakteriální růst v některých lahvičkách. MIC je koncentrace antibiotika, kde není pozorován žádný viditelný bakteriální růst. Hodnota MIC je řízený způsob, jak posoudit měnící se rezistenci bakteriálních kmenů a stanoví limity antibiotické léčby infekcí.