Qu'est-ce qu'un antibiogramme?
Un test antibiogramme peut être utilisé à deux fins différentes. La méthode Kirby-Bauer est utilisée pour tester la sensibilité d'une souche bactérienne à divers antibiotiques. Les antibiogrammes peuvent également déterminer la concentration minimale inhibitrice (CMI), ou la plus petite concentration d'un antibiotique qui inhibera la croissance de la souche bactérienne, en utilisant la méthode de dilution.
La méthode Kirby-Bauer est un antibiogramme utilisé pour déterminer le meilleur antibiotique à utiliser contre une souche bactérienne particulière. Les tests sont effectués dans des boîtes de Pétri, qui sont des boîtes rondes peu profondes, couvertes, remplies d’un milieu d’agar ou d’une substance semblable à un gel infusé avec des nutriments pour favoriser la croissance bactérienne. La souche bactérienne à tester est répartie uniformément sur la surface de la plaque. Plusieurs disques de papier circulaires, chacun infusé avec un antibiotique différent, sont régulièrement répartis sur la surface de la plaque et doucement poussés dans la gélose pour établir un contact avec la bactérie. On laisse ensuite les plaques croître pendant la nuit dans un incubateur.
Après l’incubation de la nuit, chaque disque de papier est entouré d’une zone circulaire dépourvue de croissance bactérienne. Cette zone s'appelle la zone d'inhibition. Le diamètre de la zone d'inhibition pour chaque disque est mesuré et comparé à un tableau de contrôle pour déterminer si la souche bactérienne testée est résistante, intermédiaire ou sensible à chacun des différents antibiotiques. Une large zone d'inhibition signifierait que la souche bactérienne est sensible à l'antibiotique présent sur le disque de test.
La méthode de dilution est un antibiogramme utilisé pour déterminer la concentration d'antibiotique la plus efficace à utiliser contre une souche de bactérie. Il commence par cultiver ou faire croître pendant la nuit un nouveau lot de la bactérie testée, puis vérifie la pureté des nouvelles cultures ou purifie la culture. Deux bactéries de contrôle ou de comparaison sont également préparées. La concentration de la souche bactérienne est déterminée à l'aide d'un spectrophotomètre et la concentration est ajustée dans une plage appropriée pour la méthode de dilution.
Une dilution en série des antibiotiques à tester est préparée en faisant des changements croissants et graduels de la concentration dans différents flacons. Une série de concentrations d'antibiotiques variables est inoculée avec des quantités égales de la souche bactérienne testée, et l'autre série est inoculée avec les souches bactériennes de contrôle. Toutes les concentrations d'antibiotiques inoculées sont autorisées à croître pendant la nuit dans un incubateur ou jusqu'à ce qu'une croissance bactérienne visible soit observée dans certains des flacons. La CMI est la concentration d'antibiotique pour laquelle aucune croissance bactérienne visible n'est observée. Une valeur de CMI est un moyen contrôlé d’évaluer l’évolution de la résistance des souches bactériennes et de fixer des limites au traitement antibiotique contre les infections.