Was ist 2D -Gelelektrophorese?

zweidimensionale (2D) Gelelektrophorese ist eine Methode, mit der Wissenschaftler Proteinmischungen auseinander nehmen und analysieren, indem zuerst Banden von Proteinen entlang von zwei verschiedenen Achsen getrennt werden. Es ist eine Technik, die am häufigsten beim Umgang mit komplizierten oder dicken Proteinenmischungen verwendet wird, häufig mit überlappenden Größen von Proteinen. Die 2D-Gelelektrophorese unterscheidet sich von einer eindimensionalen Gelelektrophorese, da die erstere Methode die Trennung von Proteinen basierend auf zwei verschiedenen Proteineigenschaften verwendet, während eine eindimensionale Gelelektrophorese normalerweise Proteine ​​trennt, die Proteine ​​basierend auf einer einzelnen Merkmale trennten, wie bei einer einzelnen Merkmale wie Proteingröße. DNA, eine elektrische Ladung. Diese Tatsache kann zum Vorteil der Wissenschaftler verwendet werden, da geladene Moleküle durch die Größe durch ein poröses Substrat wie Agarose getrennt werden können, indem ein Spannungsgradienten über ein poröses ionisches Gel angewendet wird. ÜberZeit, Moleküle gehen durch dieses Gel in Richtung der Ladung, die der natürlichen Ladung des Moleküls entgegengesetzt ist. Kleine Moleküle und stark geladene Moleküle bewegen sich schneller als große Moleküle oder Proteine, die schwach aufgeladen sind. Bei 2D -Gelelektrophorese kann nach dem Trennen von Proteinen durch ein einzelnes Merkmal ein Gel dann seitwärts gedreht werden, um die zuvor resultierenden Bänder basierend auf einer zweiten Eigenschaft zu trennen.

2D -Gelelektrophorese verwendet häufig molekulare Ladungen von Proteinen als eine Eigenschaft, durch die Proteinaggregate in Einzelkomponenten -Proteine ​​unterteilt werden können. Proteinmasse ist ein weiteres häufiges Merkmal, das zur Trennung von Proteinen in der 2D -Gelelektrophorese verwendet wird. Nachdem Proteine ​​auf einem Gel durch eine eindimensionale Gelelektrophorese auf einem Gel geführt wurden, kann dieses Gel in einer Zentrifuge gedreht werdenER als die kleineren, weniger massiven Proteine. Die Richtung des Zuges ist senkrecht zur Richtung, in die die Proteine ​​durch das Gel durch Anziehung einer elektrischen Ladung durch einen Spannungsgradienten durch das Gel gezogen wurden.

Elektrophorese hat in molekularen Studien viele Verwendungszwecke, einschließlich der Trennung von Proteinen basierend auf synthetisierten Eigenschaften wie Protein -Markierungen. Proteintrennung basierend auf einer charakteristischen Masse wird auch verwendet, wenn Proteine ​​mit anderen Molekülen markiert werden. Diese Technik kann mit diesen Proteinkomplexen verwendet werden, da die markierten Proteine ​​leichter durch ein Gel fallen

Während viele Trenngele in Laboratorien aus Agarose bestehen, erfolgt die Proteintrennung durch 2D -Gelelektrophorese am besten auf Polyacrylamidgelen. Diese Arten von Gelen werden in Western Blots und anderen Assays auf Proteingröße verwendet. Agarose wird häufiger zur Trennung von DNA -Segmenten verwendet.