2Dゲル電気泳動とは何ですか？

2次元（2D）ゲル電気泳動は、科学者が2つの異なる軸に沿ってタンパク質のバンドを最初に分離することにより、タンパク質混合物を分解して分析するために使用する方法です。これは、タンパク質の複雑なまたは厚い混合物を扱うときに最もよく使用される手法であり、多くの場合、タンパク質の重複サイズのサイズがあります。 2Dゲル電気泳動は、前者の方法が2つの異なるタンパク質特性に基づいてタンパク質の分離を採用しているのに対し、1次元ゲル電気泳動は通常、タンパク質サイズなどの単一特性に基づいてタンパク質を分離するため、一次元ゲル電気泳動とは異なります。 DNAのような分子には、電荷があります。この事実は、多孔質のイオンゲルに電圧勾配を適用することにより、アガロースのような多孔質基質を介してサイズによって分離できるため、科学者の利点に使用できます。以上時間、分子はこのゲルを通り、分子の自然電荷とは反対の電荷に向かって通過します。小分子と帯電した分子は両方とも、帯電した大きな分子またはタンパク質よりも速く移動します。 2Dゲル電気泳動では、勾配を作成する単一の特性を介してタンパク質を分離した後、ゲルを横に回して、2番目の特性に基づいて以前に生じるバンドを分離することができます。

2Dゲル電気泳動は、タンパク質凝集体を単一成分タンパク質に分離できる1つの特徴として、タンパク質の分子電荷をしばしば採用しています。タンパク質質量は、2Dゲル電気泳動のタンパク質を分離するために使用されるもう1つの一般的な特性です。タンパク質が1次元ゲル電気泳動の単一レーンを通ってゲルで実行された後、ゲルを遠心分離機で回転させ、より重いタンパク質を速く引き下ろすことができますより小さく、それほど大きくないタンパク質よりもER。プルの方向は、電圧勾配を介した電荷への引力のために、タンパク質がゲルを通して引き出された方向に垂直です。

電気泳動には、タンパク質のタグ付けなどの合成特性に基づいたタンパク質の分離など、分子研究では多くの用途があります。タンパク質が他の分子でタグ付けされている場合、特徴的な質量に基づくタンパク質分離も使用されます。タグ付きタンパク質は、タグ付けされていないタンパク質よりもゲルを介してより容易に落ちるため、この手法はこれらのタンパク質複合体で使用できます。

研究所の多くの分離ゲルはアガロースで作られていますが、2Dゲル電気泳動によるタンパク質分離はポリアクリルアミドゲルで最もよく行われます。これらのタイプのゲルは、ウエスタンブロットやその他のタンパク質サイズベースのアッセイで使用されます。アガロースは、DNAセグメントの分離に頻繁に使用されます。